主题:【原创】六氟异丙醇HFIP作为寡核苷酸流动相,每天MS响应减弱,如何解决?

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Ins_818fd7cb
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寡核苷酸分析用离子对胺+HFIP作为流动相,B相为乙腈,流动相过一段时间(几个小时或者每天),MS响应减弱,如何解决?
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hujiangtao
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离子对做流动相对液质灵敏度影响很大,尽量不要用
lyp7788
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换新鲜的流动相。如果一个序列内需要比较TIC强度,可以每隔几针走一次QC(具体看你们实验室用什么作为QC),通过QC的强度进行校正
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原文由 lyp7788(Insp_ca0736a3) 发表:换新鲜的流动相。如果一个序列内需要比较TIC强度,可以每隔几针走一次QC(具体看你们实验室用什么作为QC),通过QC的强度进行校正
隔两天换一次流动相觉得太麻烦了,所以想解决一下这个问题,每天Ms响应减弱是因为HFIP六氟异丙醇挥发的原因吗
Ins_818fd7cb
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原文由 hujiangtao(hujiangtao) 发表:离子对做流动相对液质灵敏度影响很大,尽量不要用
做的寡核苷酸,不用离子对保留不住。想请问下为什么离子对对液质灵敏度影响很大?
lyp7788
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原文由 Ins_818fd7cb(Ins_818fd7cb) 发表:隔两天换一次流动相觉得太麻烦了,所以想解决一下这个问题,每天Ms响应减弱是因为HFIP六氟异丙醇挥发的原因吗
你用的胺应该是三乙胺吧,三乙胺和六氟异丙醇挥发性都比较强,是有可能因为挥发导致流动相配比改变的
Ins_818fd7cb
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原文由 lyp7788(Insp_ca0736a3) 发表:你用的胺应该是三乙胺吧,三乙胺和六氟异丙醇挥发性都比较强,是有可能因为挥发导致流动相配比改变的
请问如何改善呢,用过好几种胺都是这样
Ins_5e649cb5
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使用前,新鲜配吧,我这的寡核苷酸项目还蛮多的,我们还专门挪了七八台质谱专门用来做寡核苷酸的项目,要是溶剂挥发的这个问题,如果可以解决,我这应该早就解决了,而不是说一直都是建议新鲜配
Insm_e7b941b2
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原文由 Ins_818fd7cb(Ins_818fd7cb) 发表:
做的寡核苷酸,不用离子对保留不住。想请问下为什么离子对对液质灵敏度影响很大?
用HILIC吧,不知道你做的分子量是多大的
墨羽
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原文由 Ins_818fd7cb(Ins_818fd7cb) 发表:
做的寡核苷酸,不用离子对保留不住。想请问下为什么离子对对液质灵敏度影响很大?
我们这边给的解释是,做RNA不用离子对,没办法解卷积(多点带点,加23个H和加1个Na,如何区分?还得是离子对试剂让图谱中只看到加H的,然后就可以计算了),且响应弱。做RNA的质谱基本上专用的了。三乙胺之类的试剂在质谱上高残留,很难冲洗干净,导致其他离子响应变差。但是做RNA又必须使用三乙胺和六氟异丙醇之类的离子对试剂。
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