主题：【资料】义翘神州核酸高效清除解决方案及FAQ

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发表于：2023/08/28 16:19:27 楼主管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

随着生物医药领域的发展，生物制品（治疗性抗体药物、疫苗等）需求日益庞大。生物制品和生物技术药物在生产过程中通常使用到工程细胞（菌），可能会造成外源性核酸残留（如宿主的），存在致瘤、感染、干扰代谢等潜在安全风险。我国参照WHO、FDA和欧盟标准，在药典中对生物制品的核酸残留量有明确规定。生物制品的核酸残留主要集中在重组蛋白、抗体及疫苗的大规模纯化及生产过程。药典规定要求酵母、大肠杆菌表达的生物制品中DNA残留量不超过10ng/剂，CHO和Vero细胞表达的狂犬疫苗、EPO、乙肝疫苗等不超过100或10pg/剂。因此控制这些产品中外源性核酸的残留就显得极为重要。而外源性核酸残留的控制，会对生产工艺、规模放大、生产效率等产生一定程度的制约，那么如何能够二者兼得呢？全能核酸酶在生物制品宿主核酸残留方面具有一定的优势。

全能核酸酶（SuperNuclease）是一种来自于粘质沙雷氏菌（Serratia marcescens），经基因工程改造的核酸内切酶。可降解双链、单链、线状、环状的DNA和RNA，完全将核酸降解成3~5个碱基长度的5'-单磷酸寡核苷酸。义翘神州不仅可以提供研究级核酸酶，依托于ISO 13485和GMP体系，还可提供高效、高质量、应用广的GMP级别全能核酸酶。同时我们提供核酸酶残留检测试剂盒，在解决生物制品核酸污染的同时，有效降低酶本身的残留风险。

义翘神州提供不同级别全能核酸酶SuperNuclease，GMP级条件下生产的全能核酸酶SuperNuclease，无动物源性，可高效降解单链、双链、线性、环状、超螺旋等任何形式的DNA及RNA。超高活性，应用场景广泛且使用量低不易残留，质量、性能、供货能力可靠，并已完成在FDA的药物主文件申报备案（DMF Number#:35978），满足药物申报的规范。

应用场景：

①去除疫苗、重组蛋白等生物制品中的外源性核酸。

②降低大分子样本制备过程中因核酸引起的粘度问题。

③去除病毒等颗粒表面的核酸，利于病毒颗粒的纯化。

④用于预防细胞结团。

核酸高效清除解决方案常见问题FAQ

①哪些因素会影响SuperNuclease的消化效果？

酶的添加量，反应条件（例如：时间、温度、pH值），缓冲环境（例如：是否存在酶的抑制剂）等。不同样本的最佳使用量，需要经过实验摸索。

②哪些条件会抑制SuperNuclease的活性？

SuperNuclease可在较宽条件下保持活性，二价阳离子（Mg2+）对其活性至关重要。当在含有以下物质的体系中， SuperNuclease的活性会受到抑制：> 300 mM一价阳离子，> 100 mM磷酸盐，> 100 mM盐酸胍， > 100 mM硫酸铵等。

③如何去除SuperNuclease？

使用常规色谱法，如亲和色谱法和离子交换色谱法，可以很容易地去除SuperNuclease。其他方便的纯化方法，如切向流过滤（TFF）也适用于从生物制品中去SuperNuclease。

④如何灭活SuperNuclease？

采用EDTA螯合金属离子会可逆地抑制全能核酸酶活性，极端条件会造成不可逆失活，例如100 mM NaOH，70℃处理30分钟等。

⑤KIT-SSNP01是否可以用于其他品牌全能核酸酶残留检测？

实验数据显示KIT-SSNP01可检测主流进口品牌全能核酸酶产品。但由于各个公司的全能核酸酶可能在序列及工艺方面存在差异，建议进行实验验证确认后再使用。

更多详情就可以参看：https://cn.sinobiological.com/category/supernuclease-kit