西达本胺对SCLC不同亚型细胞的体外抑制作用及对其生物学功能的影响

CCK-8药敏实验结果显示，SCLC细胞系H69、H446、H526、SW1271经不同浓度西达本胺处理 24、48、72、96、120h后，细胞产生明显的增殖抑制现象，且随着药物浓度增加及作用时间延长，抑制作用逐渐增强，呈现出时间-浓度依赖性（图1）。流式术结果显示，用不同浓度（IC20、IC50）西达本胺处理SCLC细胞系48h后，四种亚型细胞系凋亡率均上升，且与加药浓度成正比，如图2 A和2B所示。48h检测在IC20、IC50浓度下H69细胞凋亡率为8.45%和14.46%，H446细胞凋亡率为8.88%和41.6%，H526细胞凋亡率为11.48%和20.77%，SW1271细胞凋亡率为11.83%和16.07%，与对照组相比，差异具有统计学意义（P<0.05）（图2C）。随后我们使用不同浓度（IC20、IC50）西达本胺处理SCLC细胞系48 h后，通过软琼脂克隆和平板克隆实验检测了四种细胞克隆形成能力的变化，发现随着加药浓度的增加细胞单克隆体积明显减小，数量也明显减少（图3A和3B）。同时将各组细胞克隆的集落数绘制成柱状图（图3C），发现与对照组相比，随着加药浓度增加细胞克隆形成率逐渐降低，差异具有统计学意义（P<0.05）。以上结果显示，在体外西达本胺单药对SCLC四个不同亚型细胞均有不同程度的增殖抑制并且可以诱导其凋亡。

图2. 西达本胺抑制SCLC细胞克隆形成。图3A.不同浓度（IC20、IC50）西达本胺作用48h后H69、H446、H526、SW1271细胞克隆第14天显微镜拍照（标尺：4×: 500 mm ,10×: 250 mm，20×: 125 mm）; 图2B. H446、SW1271细胞平板克隆实验结晶紫染色结果; 图3C. 不同浓度（IC20、IC50）西达本胺作用48 h后H69、H446、H526、SW1271克隆形成率柱状图，与对照组相比差异显著，具有统计学意义（每组n=3。**P<0.01，***P<0.001）。

2）西达本胺单药对SCLC不同亚型细胞的体内抑制作用

建立SCLC不同亚型细胞荷瘤小鼠模型，研究西达本胺的体内抗肿瘤作用。H526组的对照组、低剂量组和高剂量组的裸鼠瘤体体积为（990.410±92.776）mm³、（300.063±63.011）mm³、（388.562±250.749）mm³；H69组的对照组、低剂量组和高剂量组的裸鼠瘤体体积为（450.766±349.358）mm³、（88.138±54.225）mm³、（96.729±14.6330）mm³；H446组的对照组、低剂量组和高剂量组的裸鼠瘤体体积为（246.058±29.462）mm³、（136.940±95.914）mm³、（90.789±19.681）mm³；三组不同的细胞系裸鼠移植瘤给药组与对照组相比，生长速度减慢，瘤体的体积明显较小，而裸鼠体重数值组间无显著差异，西达本胺表现出了较高的抗肿瘤活性以及较低的细胞毒性。