1. 基本原理

搅拌棒吸附萃取Stir Bar Sorptive Extraction(SBSE)是一种无溶剂的同时萃取和富集技术，其萃取原理是利用分析物在样品相和吸附层之间的分配系数，在达到平衡后，完成萃取过程。具有检出限低 (ppt)，灵敏度高，操作简便的特点。当搅拌棒（twister）吸附目标物完成后，放入TDU或TD3.5+热脱附进行热脱附，进入CIS冷阱保留，冷阱然后快速升温而把目标物转送到GCMS进行分析。适用于各种微量或痕量样品的前处理。

一般香气香味样品（不含油脂或极少量油脂）样品含不同基质，不同状态，加水或饱和氯化钠水溶液使食品样品成为水溶液，然后放入搅拌棒提取（SBSE）。在溶液中加入NaCl（或饱和氯化钠水溶液代替），来增加离子强度，减少有机化合物的溶解度，有利于更好的提取有机化合物，即盐析作用。但注意，少数情况下，某些成分加盐可能会降低提取效果，需要用实验来验证评估是否需要加盐。

目前主要有两种种类搅拌棒：Twister, PDMS和EG-Silicon （Gerstel)

需要使用仪器设备：

TDU或TD3.5+热脱附装置，MPS多功能进样平台

GCMS气相色谱质谱联用仪

2. 基本操作方法

2.1样品前处理：

2.1.1对于液体样品，可以直接提取或加水稀释。一般取2-15g左右样品（根据风味化合物的含量而定）于20ml顶空瓶，加入20-30%的氯化钠。对于固体，半固体或粉末样品，取0.5-3g左右样品（根据风味化合物的含量而定）于20ml顶空瓶，加水2-10g，加氯化钠30%（以加水量计），或直接加入饱和氯化钠溶液，放入磁力吸附搅拌子。如果需要半定量，加入适量内标物。放入磁力吸附搅拌子，放在电磁搅拌器上面，转速约800-1000rpm，一小时后，用Gerstel专用工具或镊子取出（吸取）Twister，用去离子水冲洗干净，用无味无添加不掉屑纸巾（无尘纸）擦干净，放入TDU2或TD3.5+热脱附管，放入TDU样品托盘，运行序列，进行热脱附。

2.1.2对于含量极少的稀薄液体样品处理----顺序搅拌子提取（Seq-SBSE）：

对于含量极少的稀薄液体样品，或要想得到更完整的信息，更灵敏的结果，可以采样顺序搅拌子提取（Seq-SBSE）。取10-15g左右样品（根据风味化合物的含量而定）于20ml顶空瓶。如果需要半定量，加入适量内标物。放入第一个磁力吸附搅拌子，放在电磁搅拌器上面，转速约800-1000rpm，提取一小时后，用Gerstel专用工具或镊子取出（吸取）Twister，用去离子水冲洗干净，用无味无添加不掉屑纸巾（无尘纸）擦干净，放入TDU2热脱附的小管待用。然后加入氯化钠30%的氯化钠，放入第二个磁力吸附搅拌子，放在电磁搅拌器上面，转速约800-1000rpm，提取一小时后，用Gerstel专用工具或镊子取出（吸取）Twister，用去离子水冲洗干净，放入同一个TDU2热脱附的小管，放入TDU样品托盘，运行序列，进行热脱附。

2.1.3 SBSE操作流程示意图：

图1. 单Twister的SBSE操作流程示意图

图2. 顺序SBSE示意图

3 热脱附条件及气相色谱质谱条件:

3.1 热脱附条件

进样口：CIS4-PTV大体积冷进样口，温度-30℃-250℃， 15℃/S；分流比10-20：1（分流比以灵敏度可适当调节）。

TDU或TD3.5+：25-230℃（PDMS搅拌棒），25-220°C（EG-Silicon搅拌棒），50℃/min，不分流，传输线温度：260℃

GC/MS条件

3.2 色谱条件:

根据实验室条件和目标物分析要求而选定

质谱条件:

根据实验室条件和目标物分析要求而选定

4. 搅拌棒吸附萃取SBSE适用范围

搅拌棒吸附萃取SBSE适用范围很广泛，几乎各种香气香味样品都可以使用，例如可以应用于各种基质的样品前处理，例如各种食品饮料，酒类，茶叶，植物，冰淇淋，奶制品，酸奶，菜肴，水，香精，日用消费品，个人护理产品，日化产品等样品种挥发性风味化合物的分析。

5. 搅拌棒吸附萃取SBSE特点

对于样品基质复杂，其香气风味成分测定需要一种简单快速，无溶剂或少许溶剂的提取富集技术。搅拌棒吸附萃取SBSE具有灵敏度，操作简便特点。和一般LLC，SDE，SPE，SAFE等样品提取制备方法相比，搅拌棒吸附萃取（SBSE）是一种无溶剂的用于萃取和浓缩痕量有机物的技术。不需要大量溶剂，样品量少，无需浓缩等步骤。是一种绿色无溶剂化学分析方法。

SBSE具有比SPME，以及SPME Arrow更大的吸附层体积（24-126 μL vs. 0.5 μL vs. 10.2 μL），故其灵敏度比SPPME要高出50-250倍，同理也比SPME Arrow要高几倍。图1为SBSE、SPME Arrow、SPME的理论回收率的示意图，当样品体积为10mL，SBSE的萃取层体积为24 μL，SPME Arrow的萃取层为10.2 μL, SPME的萃取层为0.5μL时，对不同极性（以Log Ko/w指数来表现）的化合物的理论回收率。

图3是茶水的SBSE和SPME比较。明显看出来SBSE的灵敏度要比SPME高。尽管SBSE采用分流进样模式，而SPME采用不分流进样模式，如果SBSE采用不分流模式，那峰会大许多。特别在中后段SBSE明显具有很大优势。茶水中关键香气化合物茉莉内酯，吲哚的峰远远高许多。