主题：【资料】义翘神州纳米抗体制备服务详解

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发表于：2023/11/29 16:40:59 楼主管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

纳米抗体是一种非常有前景的下一代治疗性抗体技术，受到越来越多的研究机构和制药公司的关注。为支持纳米抗体药物的早期发现，义翘神州利用噬菌体抗体库技术自主研发了纳米抗体开发平台，已成功开发了多个纳米抗体候选分子。另外，我们的高通量纳米抗体表达平台，已成功表达和生产了多种纳米抗体形式，包括单价、多价或多特异性VHH，满足客户的各种定制需求。

①纳米抗体开发服务

不同于经典的杂交瘤技术制备单克隆抗体，纳米抗体开发的整个流程主要包括羊驼免疫、噬菌体文库构建、抗体筛选、表达纯化及验证等阶段。羊驼免疫后，从羊驼外周血分离B淋巴细胞，提取总RNA，反转录为cDNA，以cDNA为模板PCR扩增获得多样化的纳米抗体基因片段，然后将其连接到载体上，从而构建噬菌体文库。随后进行多轮淘洗步骤获得抗原特异性纳米抗体，并对其进行测序、表达和验证。

义翘神州建立了纳米抗体开发平台，可提供一站式的纳米抗体定制服务，主要包括抗原设计与制备、羊驼免疫、文库构建、淘洗、单克隆鉴定、测序以及活性分析等实验步骤，已成功交付多个纳米抗体开发项目。获得的纳米抗体需要进行进一步的人源化改造，以降低其免疫原性，实现最佳的治疗效果。义翘神州提供的纳米抗体人源化服务，利用CDR置换技术及计算机辅助结构模拟设计可对羊驼纳米抗体进行人源化改造，保证人源化程度 >95%，成功率100%。我们也提供体外药效评价解决方案，满足纳米抗体成药性评估、生物学活性测定等应用场景。

②高通量纳米抗体表达服务

义翘神州自主研发的高通量重组抗体表达平台，结合了专业的高通量引物合成和载体构建等，可实现高通量抗体表达。除全长IgG抗体外，义翘神州可表达多价VHHs以及VHH-Fc融合型抗体等多种形式，成功率很高，满足客户不同的个性化需求。

具体流程如下：获得纳米抗体序列文库之后，通过高通量引物合成和载体构建建立纳米抗体表达文库，转至HEK293细胞进行摇瓶培养，通过Protiein A或Ni亲和层析一步纯化，得到纯度大于90%的纳米抗体，纯化后抗体均通过功能验证再进行放大生产。

③无细胞系统纳米抗体表达服务

除了利用HEK293细胞表达纳米抗体外，义翘神州还自主研发了无细胞表达系统，也可实现纳米抗体高通量表达。该系统以外源DNA或mRNA为模板，通过在细胞抽提物的酶系中添加氨基酸、能量物质等实现纳米抗体的体外合成，将原本需要几天的表达过程缩短至几小时，更加快速、高效。义翘神州可提供优质的VHH及scFv快速表达服务，加速您的研发进程。

具体服务流程如下：首先合成基因、构建载体(可选)，接着利用无细胞合成系统合成纳米抗体，再经纯化以及可行性分析，得到可交付的高质量抗体。

原文出自：https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/nanobody