主题：【资料】亲和标签：定义及其种类概述

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发表于：2023/12/04 16:55:11 楼主管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

亲和标签是指在重组蛋白的N端或C端添加的一段短肽，可以促进表达蛋白的纯化，亲和标签序列通常包含几个到几百个氨基酸。许多标签还可以提供与纯化无关的附加功能，例如促进目标蛋白的检测或改善目标重组蛋白的溶解性。那么常见的亲和标签有哪些？

①Flag-tag

Flag标签是由八个亲水氨基酸（DYKDDDDK）组成的一个短肽，分子量很小，因此不会遮盖融合蛋白中其他蛋白表位与结构域。该标签具有天然的亲水特性，可位于蛋白质的C端或N端，利于抗体检测，同时含有一个肠激酶切割位点，可通过肠激酶切除标签。

②His-tag

His-tag由人工合成的组氨酸首尾相连构成，通常由6个氨基酸（HHHHHH）组成，也有3个和8个的情况。His融合标签与其他标签相比有很多明显优势，是目前用于纯化的融合标签中使用最为广泛的一种。His标签融合蛋白一般采用固定化金属离子亲和层析进行分离纯化，操作较为简便。

③StrepⅡ-tag

StrepⅡ即链霉亲和素结合肽，是一个小分子的短肽标签，由8个氨基酸（WSHPQFEK）组成，可位于融合蛋白的任一位置。广泛应用于多种目标蛋白在原核表达系统、哺乳动物表达系统等的纯化。

④GST-tag

GST即谷胱甘肽-S-转移酶，具有解毒作用，可将谷胱甘肽中的硫基转移至含硝基或卤化物的复合物中。其天然大小为26KD。近年来，商品化的GST融合蛋白表达体系以及GST标签抗体系统至今仍被广泛应用。近年来在原核表达体系中，谷胱甘肽S转移酶GST表达纯化系统的应用更为普遍。

⑤HA-tag

HA标签蛋白，标签序列YPYDVPDYA，源于流感病毒的红细胞凝集素表面抗原决定簇，9个氨基酸，对外源靶蛋白的空间结构影响小，容易构建成标签蛋白融合到N端或者C端。易于用Anti-HA抗体检测和ELISA检测。

⑥C-myc-tag

c-myc 标签蛋白，是含11个氨基酸的小标签，标签序列Glu- Gln-Lys-Leu-lle-Ser-Glu-Glu-Asp-Leu，这11个氨基酸作为抗原表位，表达在不同的蛋白质框架中仍可识别其相应抗体。 C-Myc tag已成功应用在 Western-blot杂交技术、免疫沉淀和流式细胞计量术中，可用于检测重组蛋白质在靶细胞中的表达。

⑦MBP-tag

MBP-tag（麦芽糖结合蛋白）是由大肠杆菌K12的maLE基因编码的396个氨基酸组成，大小为40KDa，同GST标签一样，MBP标签能增大融合蛋白可溶性，提高其表达产量。

⑧eGFP-tag

eGFP标签蛋白，是增强型绿色荧光蛋白。eGFP激发波长为488m，发射波长为507nm，是由野生型绿色荧光蛋白GFP通过氨基酸突变和密码子优化而来的。相对于GFP，eGFP荧光强度更强、荧光性质更稳定。同时载体中构建的KOza K序列使得含有eGFP的融合蛋白在真核表达系统中表达效率更高。

⑨Avi-tag

Avi-tag是由15个氨基酸组成的短肽，具有一个单生物素化赖氨酸位点，与已知天然可生物素化序列完全不同。Avi-tag加在目标蛋白的N端和C端融合表达后，可被生物素连接酶生物素化，可用于蛋白质分离纯化及蛋白质相互作用研究。义翘神州提供生物素标记蛋白：https://cn.sinobiological.com/category/biotinylated-protein-elite

⑩Profinity eXact tag

Profinity eXact标签是由野生型枯草芽孢杆菌蛋白酶BPN’的功能前域，经基因改造而得到的大小约为8.2kDa的一段多肽。利用基因工程的方法对该功能域进行改造，提高其稳定性，使其含有一段枯草杆菌蛋白酶突变体S189的剪切识别序列（EEDKLFKAL）。由此发展的Profinity eXact亲和纯化技术越来越多的应用于重组蛋白的分离纯化实验中。

详情可以关注亲和标签汇总页面：https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/affinity-tag