原文由 支点(zhx_fs_ln) 发表:如下图。对于楼主的情况按我理解说一下。1、对C18柱子而言甲醇是强洗脱溶剂,水是弱洗脱溶剂;楼主的梯度是先以强洗脱,然后弱洗脱出峰这是不太合情理。2、一般色谱梯度是先弱后强最后洗脱后平衡到初始状态准备下一循环,楼主这个只有两个步骤对于色谱平衡不太合适。3、流动相比例改变尽量不要太快,太突然,楼主的6-6.01组分变化太急。我一般用右侧图的梯度类型来做样品分析,一共分为5个阶段:1、以水为主,洗掉不易保留的杂质。2、逐渐改变组成到以甲醇为主。3、以甲醇为主洗脱易保留组分。4、逐渐改变组成到以水为主。5、以水为主,平衡色谱柱准备下次进样。谢谢!!!