主题:【已应助】液相色谱荧光法检测吐温20含量

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对照品峰面积越来越小,液相系统没问题,是不是流动相走问题呀?流动相配完需要先放一两小时再跑吗?
推荐答案:通标小菜鸟回复于2024/01/22
一般流动相配完后超声脱气,然后放上仪器后purge管路,排气泡,平衡好仪器后就能进样,不需要配好后放置1~2个小时。进样后对照品峰面积越来越小,主要考虑两个方面,一个是样品的稳定性不好,受温度,光照影响,还有一个是样品挥发掉了。
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一般流动相配完后超声脱气,然后放上仪器后purge管路,排气泡,平衡好仪器后就能进样,不需要配好后放置1~2个小时。进样后对照品峰面积越来越小,主要考虑两个方面,一个是样品的稳定性不好,受温度,光照影响,还有一个是样品挥发掉了。
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原文由 通标小菜鸟(v3141805) 发表:一般流动相配完后超声脱气,然后放上仪器后purge管路,排气泡,平衡好仪器后就能进样,不需要配好后放置1~2个小时。进样后对照品峰面积越来越小,主要考虑两个方面,一个是样品的稳定性不好,受温度,光照影响,还有一个是样品挥发掉了。
这个方法是用荧光染色液做流动相,检测器是荧光检测器,没色谱柱,是走5米的管线,一针才走3分钟,流动相避光用锡纸包着了。样品(蛋白溶液)是去蛋白后用水溶解,应该不会挥发。做了好几遍一直是这样。对照品连续走5针后走样品,再走一阵对照。
对照品峰面积一直在下降
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