主题：【分享】【“仪”起享奥运】显微鉴别淫羊藿叶的性状方法

性状及微性状鉴别

对同一品种不同产地的淫羊藿干燥叶分别进行３次取样并观察。将样品表面清理干净，选取所需部位备用，在叶片基部徒手制作主脉的横剖面。将叶片与主脉横剖面分别放置于拍摄台上，使用单反相机和微距镜头，并结合景深扩展技术，收集实验样品同一位置、不同景深影像数据（每个位置３０～５０张图片），再使用Ｈｅｌｉｃｏｎ  Ｆｏｃｕｓ  Ｐｒｏ７.７.０专业版聚焦堆叠软件得到高清全息彩色图像数据。

显微鉴别

表皮制片　取完整叶片参照２０２０年版《中国药典》四部通则２００１显微鉴别法，采取定位取材、徒手切片法获取观察切片，于显微镜下观察，并用相机收集图像数据。
横切面制片　分别选取淫羊藿叶片的上、中、下３部分，用剪刀分割成小块，于酒精乙酸福尔马林混合液（ＦＡＡ）固定液中固定４８ｈ后漂洗，体积分数１％番红（体积分数５０％乙醇配制）染色，乙醇和二甲苯进行脱水透化，经二甲苯溶液透明后浸蜡包埋；蜡块用纯水浸泡后切片，郝氏粘贴剂贴片，５０℃下保存２ｄ，用二甲苯进行脱蜡处理；体积分数０.５％固绿染液（体积分数９５％乙醇配制）染色，中性树胶封片。分别置于显微镜下，采用正常光明场和偏振光暗场对比观察法，并收集图像数据。
粉末制片　样品粉碎过筛，参照２０２０年版《中国药典》四部通则２００１显微鉴别法制片，于显微镜下观察，并收集显微图像数据。
样品测量　将样品置于显微物镜下，用相机收集清晰的完整叶片图像，利用ＩｍａｇｅＪ的角度测量工具测量叶边缘刺的角度；选取叶上表皮细胞制片，用目镜测微尺测量叶上表皮细胞波状深度占比（上表皮细胞边缘两波峰中间点至波谷的距离，除以两波峰中间点经过波谷延伸至另一边细胞边缘的距离）；选取有乳突的淫羊藿叶下表皮制片，用相机收集清晰的显微图片，利用Ａｄｏｂｅ Ｐｈｏｔｏｓｈｏｐ截取像素大小相同的区域，将图片导入ＩｍａｇｅＪ，调整阈值，去除背景后，利用Ａｎａｌｙｚｅ  Ｐａｒｔｉｃｌｅｓ插件自动分析，得到乳突密度（淫羊藿叶下表皮单位面积内乳突面积／淫羊藿叶下表皮单位面积×１００％）；以上数据，不同品种均随机选取测量２０次。