主题：【分享】【金秋计划】平行样品水分检测不平行问题

问题：多份平行样品水分测定，结果在0.03%~0.24%之间波动。均值约为0.08%。

一、水分测定平行样品间测定结果波动的可接受标准：

来源于网络：当检出值小于 0.1%，检测结果差值忽略不计；当检出值为0.1~1%，检测结果差值不得超过0.1%；当检出值大于1%，检测结果相对标准偏差不得超过15%。二、测定方法

测定方法：中国药典2020年版四部通则0832第一法1

样品取样量：0.3g

水分限度值：0.4%

三、水分测定原理

1、碘和二氧化硫在吡啶和甲醇溶液中与水定量反应的原理来测定水分（中国药典）。2、碘将二氧化硫氧化为三氧化硫时，需要一定量的水分参加反应（中国药品检验标准操作规范）3、利用碘将二氧化硫氧化为三氧化硫时,需要一定量的水分参加反应,由消耗碘的量可计算水分的含量。（中国药典分析检测技术指南）4、微水分测定法基于水在具有足够缓冲能力的碱存在下，在合适的无水介质中与二氧化硫和碘发生的定量反应。（EP11.5）通过上述不同法定来源测定原理的描述可知，碘消耗的多少直接与样品含水量相关；测定值的波动，也就是消耗碘量的波动。四、影响因素分析水分测定的影响因素可以归纳为：1、供试品的溶解度；2、供试品的结构；3、供试品的酸碱性；4、供试品的物理特性（如，引湿性）；5、选择的水分测定方法；

五、结论与讨论
归纳测定水分波动的原因为：1、水分测定时，未能及时更换溶剂，导致多次加入供试品后，出现饱和，后续测定的样品未能完全溶解。2、该化合物含有酸根基团，会与甲醇反应产生水，干扰测定。3、选择的水分测定方法不合适。

解决方法：

1、 选择库伦法进行水分测定2、 将常规的卡尔费休氏滴定液更换掉，选择卡尔费休氏醛酮试剂3、 多次样品测定时，要根据溶解情况，及时更换溶剂六、水分测定知识延伸（参考：周浩,王慧洁,赵媛媛,等.药品水分测定方法的选择及策略[J].中国药科大学学报,2022,53(01):113-119.）1、 采用卡尔费休氏醛酮试剂的情况：部分醛、酮、强酸、硅醇基团和硼化合物可以与甲醇发生反应并产生水，干扰水分测定。此时，可以更换滴定剂，也可以同时将溶剂更换成卤化醇。常见的反应如下：（1）羟醛缩合反应  活泼羰基化合物与甲醇作用可产生缩醛（或缩酮）和水，醛比酮的反应活性高。随着碳链增长，反应活性降低。解决措施：采用醛酮专用溶剂。（2）酯化反应    部分有机酸、含硅醇基团化合物、硼酸及类似含硼化合物会与甲醇发生酯化反应生成水，酸性化合物同时会影响测试体系pH。解决措施：加入适量咪唑、吡啶等碱性试剂；采用醛酮专用溶剂或卤化醇溶剂。（3）氧化还原反应    硫醇类化合物、抗坏血酸、硫代硫酸盐和联胺及其衍生物等强还原剂会与碘发生反应，使费休氏试剂消耗增加，测试结果偏大。部分过氧化物和氢氧化物等强氧化剂会与水分测试过程生成的氢碘酸反应生成碘和水。解决措施：加入水杨酸抑制碘的氧化，也可以采用快速费休氏试剂减少副反应。（4）复分解反应    部分金属氧化物和碳酸盐会与水分测试过程生成的氢碘酸反应生成水，碱性化合物同时会影响测试体系pH。解决措施：采用卡式炉测定水分。2、 供试品有酸碱性，影响水分测定速度解决措施：根据供试品的酸碱性，在溶剂中添加拮抗剂弱碱（如，咪唑）或弱酸（如，水杨酸），以缓冲待测溶液的PH。3、 供试品极易吸湿，怎么办解决措施：控制测定环境的湿度，可加一个除湿机。或采用外部溶解法、外部萃取法、剩余滴定法、卡式炉测定法进行水分测定。注释：（1）外部溶解法采用无水甲醇或混合溶剂将供试品溶解后进行水分测试，适用于水分含量不均匀、黏度大、称量困难、水分释放缓慢和吸水性极强的供试品水分测试。（2）外部萃取法是通过无水甲醇或混合溶剂将供试品中的水分萃取出来，适用于溶解性较差、水分分布不均匀和辅料有干扰的供试品水分测试。（3）剩余滴定法通过向供试品中加入过量已标定的费休氏滴定液，利用已标定的水-甲醇标准溶液中微量水分对过量部分的费休氏滴定液进行返滴定。（4）卡式炉法是在适宜的温度下加热供试品，通过一定流速的氮气，将蒸发出来的水分导入滴定杯中进行测试。本法适用于溶解性较差、成分复杂、存在副反应、水分释放缓慢和吸湿性较强的供试品水分测试。4、 供试品溶解性差解决措施：添加助溶剂。要求助溶剂不参与反应，不会减缓滴定反应（不建议选择DMSO，二元醇、三元醇作为助溶剂）。常见助溶剂有：氯仿、醇、甲酰胺、N-甲基吡咯烷酮、吡啶、甲苯、二甲苯。5、 容量法与库伦法的选择容量法适用于常量水分分析，一般消耗滴定液约1~5ml较为合适；库伦法适用于微量水分测定，一般供试品的含水量约为0.5~5mg。