楼主,使用哈希紫外分光光度计测量同一瓶溶液稀释不同倍数后的含量,所得数据并非呈预期的倍数关系,可能有以下原因:
1.复色光对比耳定律的偏离:尽管哈希紫外分光光度计能获得近似单色光,但仍含有狭窄光通带,具有复色光的性质。这可能导致比耳定律的正或负偏离。尤其是在溶液浓度较小且单色光较纯时,这种偏离可能更为明显。
2.杂散光的影响:杂散光是指进入检测器的处于待测波长光谱带宽范围外的其他波长组分,它是光谱测量中误差的主要来源。其产生原因包括分光光度计的色散元件、反射镜、透镜及单色器内壁灰尘等。在分光光度计工作波段边缘波长处,由于单色器透光率、光源辐射强度、检测器灵敏度都较低,杂散光的影响更为显著。当在分析波长处含有杂散光时,样品的透光率较小,而杂散光大部分透过,会使测量吸光度低于真实吸光度。
3.仪器误差:仪器本身可能存在一定的误差,这可能影响测量结果的准确性和重复性。
4.操作因素:例如比色皿的清洁度、使用是否正确(光面和毛面的朝向等),以及在测量过程中是否有外界干扰等。
5.溶液本身的性质:溶液中的成分可能会影响吸光度的测量,例如存在一些可能干扰测量的物质。