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紫外可见分光光度计（UV）
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主题：【求助】求助！测出的吸光值为负值？

浏览0 回复31 电梯直达
zhengchen5916
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发表于：2007/05/28 14:54:00 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
我用岛津的紫外分光光度计测DNA在260和280的紫外吸收值，结果得到了下面的数据，请各位大侠帮我分析一下啊：
          稀释倍数  A260    A280
对照标准品  50      0.048  -0.034

  样品      50      0.101  0.024
            60      0.073  -0.001
            70      0.041  -0.026
            80      0.039  -0.28
            90      0.039  -0.29
            100      0.058  -0.14
注：我的空白对照是水。
  这是我的实验中一次用到紫外分光光度仪，结果第一次测出的值就这么恶心，打击啊！再请问一下，从这组数据中能确定稀释倍数吗？我的标准样品的浓度为50ng/μl,我想通过标准样品来测我自己的样品的浓度，我应该怎样设计我的实验呢？
老板催得紧，我又不是学分析专业的，在这方面是外行，请各位高手帮帮我啊，小女子先谢过了！
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2007/5/28 15:29:00 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
60 0.073 -0.001
70 0.041 -0.026
80 0.039 -0.28
90 0.039 -0.29
100 0.058 -0.14
什么意思
你最好用WORD形式上传附件
我可以帮你设计一个实验方案
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初学者&九点虎
zhouyuhu
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2007/5/28 15:34:00 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
请问你仪器的型号
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seas7
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2007/5/28 15:43:00 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
60 0.073 -0.001
70 0.041 -0.026
80 0.039 -0.28
90 0.039 -0.29
100 0.058 -0.14
最后那个负数应该是吸光值吧？第二个数值大概是由吸光值计算得出的浓度值吧？第一个应该是样品的编号吧？总之，你的描述也太含糊了，想帮也没法帮呀。
样品的吸光值应该和标准在一个数量级比较好，但是吸光值宜设计在0.3-0.7之间比较合理。
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learner1999
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2007/5/28 15:59:00 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
我觉得还是你没操作明白机器，因为根本就不可能出现负值，参比液扣除的正确么？
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zhengchen5916
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2007/5/28 16:15:00 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
实在对不住大家，我把数据重新发一次！
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benjian1xiao
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2007/5/28 16:16:00 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
比色皿不配套。
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zhengchen5916
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2007/5/28 16:18:00 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
    稀释倍数    A260    A280
对照标准品    50    0.048    -0.034
样品    50    0.101    0.024
    60    0.073    -0.001
    70    0.041    -0.026
    80    0.039    -0.28
    90    0.039    -0.29
    100    0.058    -0.14
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zhengchen5916
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2007/5/28 16:19:00 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
     稀释倍数    A260    A280
对照标准品    50    0.048    -0.034
样品             50    0.101    0.024
             60    0.073    -0.001
             70    0.041    -0.026
             80    0.039    -0.28
             90    0.039    -0.29
           100    0.058    -0.14
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zhengchen5916
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2007/5/28 16:30:00 9楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
还是不行啊。我来解释吧：第二纵列是稀释倍数（50倍，60倍，70倍...）；第三纵列是在波长为260下的吸光值；第四纵列是在波长为280下的吸光值（多数为负值）。我的实验室要用A260来确定DNA的浓度，用A260/A280的比值来确定DNA的纯度（有无杂蛋白），此值在1.6-1.8范围内为正常。
请大家帮帮忙吧，谢谢各位大拿啦！
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zhengchen5916
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2007/5/28 16:35:00 10楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
我把附件传上来啦！
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