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主题：【求助】HPLC中不解处

浏览0 回复24 电梯直达
syxin
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发表于：2007/06/24 20:42:00 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
悬赏金额：20积分 状态： 未解决
大家好:

本人在做HPLC时,我选择了三种波长,205 225 270nm
为什么同是一种流动相,其基线相差甚大呀

仅270nm的基线在0mAu 而其它的在1000多

可是本人的样品的最大吸收波长在205处呀,怎么办????
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wsy18
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2007/6/25 9:45:00 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
流动相对不同波长的光吸收不一样。
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pnp1008
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2007/6/25 11:13:00 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
流动相在不同波长下吸收不同。205nm下可以使用ACN和水。
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家有宝贝儿
menghandna
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2007/6/25 11:24:00 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
这是很正常的，说明流动相中的物质在紫外区有吸收。
不知道楼主的流动相是什么？可以做适当的调整。
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zhanghy2205
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2007/6/25 11:30:00 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
这种现象是正常的，要看你选择的流动相的背景吸收在什么波长了。从你所描述的现象，应该是你的流动相的选择问题，如果样品最大吸收在205nm,你可以选择乙晴和水做流动相，乙晴的最大吸收波长在195nm
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maxuedong
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2007/6/25 11:32:00 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
吸收不同，基线噪音也会不同。。。。。。。。
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87228217
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2007/6/25 14:15:00 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
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blackwolf
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2007/6/25 18:20:00 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
不是有自动归零吗
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hpt2005
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2007/6/25 18:28:00 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
不同溶剂有不同吸收峰，设计方法时得考虑测定波长与选取溶剂。
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tanggangfeng
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2007/6/25 18:40:00 9楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 syxin 发表:
大家好:

本人在做HPLC时,我选择了三种波长,205 225 270nm
为什么同是一种流动相,其基线相差甚大呀

仅270nm的基线在0mAu 而其它的在1000多

可是本人的样品的最大吸收波长在205处呀,怎么办????


每种流动相的紫外吸收是不一样的。
如果要是基线都归为零（等度下），进样前，基线BALANCE，好像可以都为零。
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biotrandglobal
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2007/6/25 19:06:00 10楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 syxin 发表:
大家好:
本人在做HPLC时,我选择了三种波长,205 225 270nm
为什么同是一种流动相,其基线相差甚大呀
仅270nm的基线在0mAu 而其它的在1000多
可是本人的样品的最大吸收波长在205处呀,怎么办????

你的问题比较难解决：样品的最大吸收波长是在205nm，而一般的流动相中试剂的截止波长都大于这个值，所以比较困难。

试试其它波长，但牺牲一些样品的吸收值，换取样品信号/流动相基线噪音（信噪比）最佳。
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