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主题：【讨论】反相色谱切换正相色谱流程

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三人行
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发表于：2013/08/03 12:35:38 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
反相色谱切换正相色谱流程：

1、先将色谱柱用相应的溶剂冲洗干净，然后将色谱柱拆下来密封保存。用双通将进样器与检测器连接。

2、将贮液瓶内装入300ml的二次蒸馏水，将流速渐次提高到2.0ml/min冲洗系统1.5h。注意观察泵压。

3、将流速渐次降到0ml/min，把二次蒸馏水更换为甲醇，将流速渐次提高到2.0ml/min冲洗系统1h。

4、用同样的方法将甲醇更换为异丙醇、四氢呋喃，各冲系统1h。

5、最后将四氢呋喃更换为预先配制好的流动相冲系统1h，同时将柱塞杆清洗系统内的10%异丙醇更换为流动相，保持50-60滴/min的速度清洗柱塞杆。再将双通更换为正相色谱柱，待色谱柱平衡好以后就可分析样品了。

在实际工作中你是怎样切换的呢？
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2013/8/3 18:57:52 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
按照操作规程来做，不然出了问题不好处理。
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三人行
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2013/8/3 19:50:44 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 ECHO007(v2769262) 发表:
按照操作规程来做，不然出了问题不好处理。


我们一般是将甲醇更换为异丙醇，几乎不用四氢呋喃。
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ECHO007
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2013/8/4 11:52:41 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 三人行(jncxyy2012) 发表:
原文由 ECHO007(v2769262) 发表:
按照操作规程来做，不然出了问题不好处理。


我们一般是将甲醇更换为异丙醇，几乎不用四氢呋喃。


这样做是出于什么考虑呢？
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三人行
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2013/8/4 13:06:28 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 ECHO007(v2769262) 发表:
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原文由 ECHO007(v2769262) 发表:
按照操作规程来做，不然出了问题不好处理。


我们一般是将甲醇更换为异丙醇，几乎不用四氢呋喃。


这样做是出于什么考虑呢？


四氢呋喃中易有过氧化物，怕损伤色谱柱。
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御风飘逝
yuanrui82
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2013/8/4 14:30:06 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
如果以前用到过盐类，才会用纯水冲，然后异丙醇，然后直接用到的正相流动相。
如果没有用到盐类，直接异丙醇过滤，然后正相流动相。
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三人行
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2013/8/4 14:50:08 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 御风飘逝(yuanrui82) 发表:
如果以前用到过盐类，才会用纯水冲，然后异丙醇，然后直接用到的正相流动相。
如果没有用到盐类，直接异丙醇过滤，然后正相流动相。


如果正相流动相中没有异丙醇，怎样防止异丙醇对流动相造成污染？
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御风飘逝
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2013/8/4 15:34:23 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 三人行(jncxyy2012) 发表:
原文由 御风飘逝(yuanrui82) 发表:
如果以前用到过盐类，才会用纯水冲，然后异丙醇，然后直接用到的正相流动相。
如果没有用到盐类，直接异丙醇过滤，然后正相流动相。


如果正相流动相中没有异丙醇，怎样防止异丙醇对流动相造成污染？
没有异丙醇，先用少量的流动相清洗管路，然后再换上大量的流动相走基线（避免异丙醇污染流动相）。
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三人行
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2013/8/4 23:28:45 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 御风飘逝(yuanrui82) 发表:
原文由 三人行(jncxyy2012) 发表:
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如果以前用到过盐类，才会用纯水冲，然后异丙醇，然后直接用到的正相流动相。
如果没有用到盐类，直接异丙醇过滤，然后正相流动相。


如果正相流动相中没有异丙醇，怎样防止异丙醇对流动相造成污染？
没有异丙醇，先用少量的流动相清洗管路，然后再换上大量的流动相走基线（避免异丙醇污染流动相）。


这个办法比较好。
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ECHO007
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2013/8/5 8:16:58 9楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 三人行(jncxyy2012) 发表:
原文由 ECHO007(v2769262) 发表:
这样做是出于什么考虑呢？


四氢呋喃中易有过氧化物，怕损伤色谱柱。


有没方法将其试剂中的过氧化物去取掉。
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三人行
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2013/8/5 8:35:09 10楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 ECHO007(v2769262) 发表:
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原文由 ECHO007(v2769262) 发表:
这样做是出于什么考虑呢？


四氢呋喃中易有过氧化物，怕损伤色谱柱。


有没方法将其试剂中的过氧化物去取掉。


用蒸馏的方法可以去除。
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