主题:过了磷酸缓冲液的流动相怎么个冲洗法啊?新手,谢谢!

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fengminyi
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请问过了含磷酸盐缓冲液流动相(甲醇:水=70:30),怎么个清洗法?能用纯水冲吗?如果可以,冲多长时间后换成用有机相冲洗,多大比例的有机相?谢谢
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前面的帖子有这个问题的,用水的比例达些就行90:10水:甲醇,然后甲醇冲就可以。你可以查查前面的
bwaic163
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wsy18
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liquchang
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绝对不能用100%水冲柱子,这样固定相就会流失,你的柱子很快就没了,先是用含大比例水的甲醇水冲,最好是冲一个小时以上,然后用纯甲醇来封柱。知道吗??
深海的海豚
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原文由 fengminyi 发表:
请问过了含磷酸盐缓冲液流动相(甲醇:水=70:30),怎么个清洗法?能用纯水冲吗?如果可以,冲多长时间后换成用有机相冲洗,多大比例的有机相?谢谢

原则上用水替换掉原来体系中的缓冲盐,所以可以用30%的水相,但是通常都会用大约80%左右的水/甲醇冲,冲洗时间决定于你的流速和柱长,理论上为20倍柱体积,懒一点可以冲20~30分钟(15cm柱)40~60分钟(30cm柱)
lsh_fei
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95%水冲长一点时间,最好是一个小时以上,然后慢慢换至有机相冲就好了
苦咖啡×友全
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你可以先用5-10%的甲醇水冲半小时(正常流速)或一小时(小流速),然后用甲醇封柱,就OK 了
蒙哥麻利
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先用水冲洗30分以上,再用甲醇:水=80:20冲20分,最后用甲醇过渡10分;最好不过夜。
thj8928656
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原文由 163xin 发表:
先用水冲洗30分以上,再用甲醇:水=80:20冲20分,最后用甲醇过渡10分;最好不过夜。

这样洗有点麻烦。水洗40分钟,再用甲醇过度就行了
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