主题：【求助】固相萃取问题

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yitianziyun521

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发表于：2007/04/11 18:02:00 楼主管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

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各位大侠，我初次做固相萃取，想请教一些问题：
1 我用C18柱子，预处理时用甲醇和水，用多少量合适？
2 做1ml血浆样品，是不是用500mg/ml规格的柱子即可？
3 因为经费问题，想重复利用柱子，应该怎样处理？是不是即时用甲醇超声即可？
4 谁有关于固相萃取好的资料，可否推荐一下，初次操作，感觉一片茫然。
谢谢大家！

推荐答案：lexmark回复于2007/04/12

1、各5mL依次活化即可
2、目前商品化的SPE柱基本分为0.5g和1g两种。一般都可。
3、做条件可重复使用，可采用超声波，但有的柱子会把柱子上的字超声波下来，污染柱子。做样品就不要重复了吧^_^。柱子也不太贵吧。
4、SPE的资料论坛多了去，自己能搜一大把何必让大家重复传？？？？

补充答案：

zkydhs回复于2007/11/13

1 活化采用2mL×3甲醇即可，活化水的pH值最好和样品一致或相近，建议调节活化水的pH
2 1mL血样，500mg/L的C18柱已足够吸附，500mg为硅胶填料的质量，6mL为柱子体积
3 采用甲醇超声待溶剂干后，填料极易发生松动，影响回收率的回收，建议不要重复使用。
4 用水活化后，不能让柱子干涸再上样，否则会柱子流速，因C18是反相柱。
5 样品过柱完后，不能过分抽干柱子，尤其不宜采用压力泵抽干，那容易发生填料“崩塌”，影响回收率。建议用氮气吹干

开心的果子回复于2007/04/11

我也在做固相萃取，不过我做的是农残，预处理过程又叫活化过程，我是先用丙酮再用甲醇和水活化的，重复利用柱子的问题，我一般都是把填料抠出来自己填的，如果想重复利用的话，我想，可能需要对填料进行处理吧，处理完可以检测下看里面的目标物是否被洗干净，下次就可以采用同样的步骤进行重复处理了。资料吗，我这不多你看能否用上吧。以后多交流！！~~
固相萃取资料
 固相萃取指南

xujuanjuan99回复于2007/09/12

一般来说，用1个柱体积的甲醇活化柱子，基本一次完成就可以了，但如果固定相没有完全浸透的话，应再多活化一次，否则会影响你的回收率，然后再用一个柱体积的调节好PH值的纯水（与你的样品稀释溶剂PH值一致）平衡柱子。
一般固定相的样品处理量是其质量5%，也就是5mg。
本人没有实际操作过，从资料上看1ml的血浆可用100mg/1ml的柱子，你自己可以根据实验结果再做合适的调节。

我在故我思回复于2007/04/13

100mg应该是柱子中的填料的质量，一般的柱子体积好像是6mL的。
重复使用的问题，正如楼上所说的那样，做样品的时候最好还是不要重复使用。