主题：【资料】冰冻扫描电镜技术

摘要：
扫描电镜工作者都面临着一个不能回避的事实，就是所有生命科学、以及许多材料科学的样品都含有液体成分。很多动植物组织含水量达到98%，这是扫描电镜工作者最难对付的样品问题。
冰冻扫描电镜技术是克服样品含水问题的一个快速、可靠和有效的方法。这种技术还广泛地被用于观察一些“困难”样品，如那些对电子束敏感的具有不稳定性的样品。冰冻扫描电镜技术还有一个常被忽略的应用领域，即通过不同的时间间隔的样品溶解来研究动态过程（工业上或其他方面应用）。
各种“高压”模式如VP、LV和ESEM的出现，已允许扫描电镜观察未经冷冻和干燥的样品。但是，冰冻扫描电镜仍然是防止样品丢失水分的最有效方法，它能应用于任何真空状态，包括装置于SEM的Peltier台上以及向样品室内冲以水气。冰冻扫描电镜还有一些其他优点，如具有冷冻断裂的能力以及可以通过控制样品升华刻蚀来选择性地去除表面水分（冰）等。
常规扫描电镜样品制备的缺点：
 皱缩和变形
 可溶性物质被提取
 可弥散性物质的移位
 机械损伤，脆弱样品在常规操作时易损伤
 制备过程慢（常在24小时以上）
 有毒试剂

冰冻扫描电镜技术的优点：
 能保持可溶性物质
 可弥漫物质很少移位
 机械损伤小
 基本上不用有毒试剂
 是对样品进行动态实验的唯一方法（不同时间间隔冷冻-在实验室内或外面）
 过程快，从新鲜材料到观察冷冻、断裂和喷涂样品可在5分钟内进行
 高分辨能力（与低真空技术相比）
 通过低温断裂获取额外信息（与常规和低真空SEM方法比较）
 很适合液体、半液体、和电子束敏感样品
 具有选择性刻蚀能力（通过升华显露内在信息）
 具有重复使用样品能力（例如：对样品重复断裂和涂覆）

冰冻扫描电镜的方法

首先将样品固定在适当的样品支架上，具有各种不同类型的支架可选择以适合不同的样品。样品支架本身安放在巧妙设计的冷冻/真空转移杆上。将样品插入冷冻剂，通常是液氮，然后在真空下转移至冰冻扫描电镜Polaron PP2000或PP2000T样品制备室的冷台上，这一样品制备室直接安装在扫描电镜腔室的一个扩展口上。样品制备室可由机械泵和涡轮分子泵抽真空。样品制备室内有进行样品操作、断裂、刻蚀（升华）和涂覆的设备。最后，将位于样品制备室与扫描电镜室之间的阀门打开，将样品转移到扫描电镜的冷台上。

冰冻扫描电镜技术的应用

冰冻扫描电镜最常用与生命科学，包括植物学、动物学、真菌学、生物技术、生物医学和农业科学。
最近，冰冻扫描电镜技术已成为药物学、化妆品和保健品工业的重要工具，主要用于应用基础研究以及对许多产品如乳制品、化妆品和药物递送系统的QA。
冰冻扫描电镜技术一直是食品工业的标准检测方法，特别是多项产品如冰淇淋、果糖蜜饯和乳制品。

详见附件，英文原作者：Mike wombwell 迈克.沃姆维尔
冰冻扫描电镜技术