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主题：【资料】电泳知识介绍（三）电泳槽

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家有宝贝儿
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发表于：2007/08/31 20:49:00 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
电泳槽是凝胶电泳系统的核心部分，其系统的迅猛发展主要也是体现在电泳槽上。根据电泳的原理，凝胶都是放在两个缓冲腔之间，电场通过凝胶连接两个缓冲腔。缓冲液和凝胶之问的接触可以是直接的液体接触，也可以间接通过凝胶条或滤纸条。管状凝胶电泳和垂直板状电泳大多采取直接液体接触方式。这种方式可以有效地使用电场，但在装置设计上有一些困难，如液体泄漏，电安全和操作麻烦等问题。水平板状电泳槽大多通过间接方式，用滤纸桥搭接
以及最近使用缓冲液制作的凝胶条和滤纸条搭接，即半干技术，后种方式使装置简化，操作也大大方便。
该帖子作者被版主 省部重点实验室加 4积分， 2经验，加分理由：xiexieO(∩_∩)O谢谢 参与
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家有宝贝儿
menghandna
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2007/8/31 20:54:00 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
圆盘电泳(disc electrophoresis )也就是管状凝胶电泳。商品仪器于1959年问世。用这种形式的装置分离后，样品带的形状酷似圆盘，故称之。它的另外一个意义是圆盘电泳通常是一种不连续电泳，而不连续电泳的英文前四个字母也是disc,但实际上连续体系的管状电泳也可以得到圆盘状的分离区带。
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2007/8/31 20:55:00 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
圆盘电泳仪通常有上、下两个电泳槽和带有铂金电极的盖。电极到各凝胶管中心的距离应该相等，以保证凝胶管之间的电场强度一致。上电泳槽中具有若干孔。孔不用时，用硅橡皮塞塞住。要用的孔配以可插电泳管(玻璃管)的硅橡皮塞。电泳管的内径早期为5-7mm,为保证冷却和微量化，现在则越来越细。电泳管的长度早期为65-70mm,为提高分辨率，现在则越来越长。电泳管应选用低碱化玻璃管，且要求内径均匀一致，以保证结果的可比性。玻璃管口不宜用火烧平，应用金刚砂磨平管日，以便于电泳后凝胶的取出。玻璃管要用洗液浸泡，用蒸馏水淋洗后，再在管中滴入丙酮，干燥备用。
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2007/8/31 20:56:00 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
垂直平板电泳槽的基本原理和结构与圆盘电泳槽基本相同。差别只在于制胶和电泳不在电泳管中，而是在两块垂直放置的平行玻璃板中间。与圆盘电泳相比，由于胶板表面积大，易于冷却而提高了分辨率。且由于冷却均匀，使分离的区带平直。其较大的优点是可在同一块凝胶板上同时比较多个样品，而保证结果的准确和可靠。且电泳后易于取出凝胶干燥保存或作电泳后的各种
鉴定，如免疫固定，放射自显影等。
    垂直平板电泳槽一般包括上、下各一个缓冲液槽。上面的缓冲液槽用于盛缓冲液和电泳时支撑凝胶板。下面的缓冲液槽除了盛缓冲液外，还用于支撑上面的缓冲液槽和冷却系统。电极由铂金丝制成，在安全盖上有两个接头与电源相连。根据可以同时电泳凝胶的数日iy分为单板和双板电泳槽。
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2007/8/31 20:57:00 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
水平电泳槽的形状各异，但结构大致相同。一般包括电泳槽基座、冷却板和电极，有的还包括安全盖。目前电泳槽基座常常包括分置于两侧的缓冲液槽，用于进行常规聚丙烯酞胺、琼脂糖、SDS、免疫和双向电泳时滤纸桥的搭接。但随着半干技术的发展，今后的电泳槽就不必需要缓冲液槽而会变得更简便。
    水乎电泳槽的关键在于冷却板。冷却效果好，凝胶在冷却板上得到充分的冷却，才可在凝胶上加高压，便能缩短电泳时间和提高分辨率。现在冷却板有两种:一种是做成中空，与外部循环水浴相连;另一种是半导体冷却系统。
    水平电泳槽的铂金丝电极由过去的固定型改变成现在的可移动型，给操作者带来很多的方便，这样便不受灌制凝胶尺寸的限制，可大可小，可长可短。
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2007/8/31 21:01:00 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
市售水平电泳仪的种类很多。其中以1973年问世的瑞典LKB公司的多用电泳仪(Multiphor)，由于其功能多，质量可靠，技术先进，操作方便等原因至今仍然为实验室所青睐，美国BioRad公司在过去水平电泳系统的基础上推出的微型等电聚焦电泳槽(MINI IEF cell)，虽然只能做等电聚焦，但比较经济。1986年Pharmacia公司推出的全自动、多功能、快速水平电泳系统(Phast System)可谓是新一代仪器，代表了当前凝胶电泳仪器的水平。这个系统分为两个部分:电泳和控制单元(这个单元包括了电泳槽，电源和半导体冷却装置)以及染色单元，整个仪器结构紧凑、小巧。并且电泳过程，包括固定、染色和脱色全部由
微机自动化控制，改变了过去电泳实验长期使用手工操作的状态，操作极为简便和快速，并保证了实验的可重复性。
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iexk007
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2007/9/5 12:24:00 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
总结的很好哟，学习学习
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青林
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2007/12/1 13:21:50 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
总结的好，向你学习！！！
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ElderYu
yuzq46
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2007/12/3 15:49:23 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
辛苦了，楼主
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bruceyang
bruceyang
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2007/12/16 16:37:31 9楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
谢谢分享!
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andy200088888
andy200088888
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2007/12/30 19:25:50 10楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
辛苦了，楼主
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