主题：【求助】关于GPC的操作注意事项

色谱柱一定是要非常小心的使用啦！而检测器中示差检测器的原理是使用物质在溶液中的折光率？？？？

GPC柱子的确是比较娇气，不过还好了，按照厂家给的说明保养应该不会有事的。
示差检测器是利用不同物质的折光率不同进行检测的，操作时要注意不能有太多干扰，不能走梯度，而且一般检测器用前要开机平衡4小时以上。
给你一个GPC的说明。
User Manual - Mono GPC

仅供参考:http://chemlab.whu.edu.cn/chem/sjsyopen.asp?id=28

最近也想了解这些问题，希望有高手指点迷津

[GPC的柱子一点也不娇气,GPC的原理也不允许它娇气。
主要是GPC分析时数据出现的问题，让用户觉得GPC系统比较娇气，主要因为易受环境、操作等因素的影响，
专业的GPC设计采用一体化设计（进样阀、分离柱、检测器处于同一个温箱内），可以实现半小时内系统稳定，样品分析，不存“娇气”的坏毛病。
如果你的GPC是娇气的那种，有意识地控制环境温度的稳定性，平衡时间控制长点，可能很多客户是晚上开机，次日白天来用。
光散射检测器比较娇贵，防止颗粒污染光散射检测器池，一般有专用的光散射GPC柱，来满足保护检测器和分析样品，建议使用！


再好的检测器，如果没有完整系统设计，也将仅仅是信号的接收器、仅仅是检测器。

一定不要把气泡带进柱子内，否则就会很快地降低柱效的。

注意：1、不能有漏液的地方，因为这里可能会把气泡带进流动相。
2、流动相尽量要脱气干净。

操 作 规 程
一 开机
1泵
在开泵之前要将流动相用超声波清洗器脱气。
打开泵的电源开关，这时泵的控制面板上的显示屏上显示等待状态，预设流量为1.000ml/min。按动控制面板上的EDIT/ENTER键，使其处于编辑状态，用上下键调节流量至0.100ml/min，然后按动RUN/STOP键使泵开始运转，这时的流量为0.100ml/min。按动EDIT/ENTER键及上下键调节流量并按动MENU键确定从而改变泵的流量。 改变流量时速度不要太快，要等泵的压力稳定之后再进行下步操做。
如果发现泵的进液管中有气泡存在，应及时除去气泡。方法是：先将泵头上的冲洗阀拧松，然后按动泵的控制面板上的MENU键使显示屏上显示purge一项，再按EDIT/ENTER键确定后即开始冲洗泵头。到预设时间（一般为5分钟）后，冲洗过程会自动停止。将菜单调回显示流速一栏，重新调节流速开始运行泵。
2检测器
打开检测器的电源开关。检测器自检后其控制面板上的显示器将显示检测器的各种参数。按动2nd func 键然后按Int℃将显示检测器的温度。要改变检测器温度时，按动2nd func 键然后按动Set℃键再输入要设订的温度值，最后按ENTER键即可。
每次更换溶剂后，需冲洗参比池30分钟左右。按动2nd func 键和Purge键可开始清洗。清洗完毕后，再按动2nd func 键和Purge键即可恢复检测状态。
3数据接收
打开数据接口电源开关并打开GPC软件，点软件上的数据接收键后，即可开始进行数据接收工作。

二 测试
1样品的配制
仪器测试样品的浓度在2g/l左右（一般用20毫克试样配制成10毫升的样品，分子量较低的试样浓度可以适当高些）。配制好的样品需放置24小时左右以使试样充分溶解。溶好的样品还要用滤膜过滤，除去不溶物质（这是为防止损坏凝胶柱）。
2 进样
进样量一般为50μl或75μl。微型注射器先用流动相清洗4到5次，然后再样品冲洗4到5次。进样时，一定要使注射器中没有气泡存在。进样时，先将检测器回零后再扳动进样器进样，大约进样5分钟后将进样器手柄扳回原位。

三 关机
测试完毕之后，应再在测试流量下继续运行30分钟左右。之后逐渐降低泵的流速直至到零。关闭泵的电源。关闭检测器的电源。关闭接口电源。退出软件。

做GPC的流动相要尽量使用色谱纯试剂，其他能过滤的溶剂或液体尽可能过滤；
在有柱子的时候尽量不要把气泡带进；
用视差检测器时，要保证温度的恒定。

GPC柱是比一般的HPLC柱娇气，而且比较贵，一万块左右。用时无非慢升慢降流速。
如果做有机流动相，注意尽量不要换溶剂，也不要让水进到柱子里。
做水相的话，主要是用完后柱子要用叠氮钠溶液保存。否则长菌柱子就废了。

看了大家的回复,都是高手啊!
  补充点:GPC柱子的确有点娇贵,不像LC柱子.流速升降太快容易导致其柱床塌陷进而使柱效降低.故在升流速的时候最好0.2ml/5min 变化(个人经验啊)
  再就是检测器的稳定时间问题,一般至少要4个小时.     
  另外拿到柱子后最好做个柱效评价.
  还有对仪器也要定期检定,定期更换易耗配件!