紫外可见分光光度计(UV)

主题:【讨论】紫外可见分光光度计得出的浓度和用公式反算不一致问题?

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cba5716029
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我门单位有台紫外可见分光光度计:现在发现个问题--仪器测量得出的浓度值和用吸光度代入得出的公式(由标准曲线得出的公式)里面算相差很大.具体数据如下:标准浓度及吸光度分别为:(1)0的浓度为:0ABS (2)0.1的浓度:0.024 (3)0.2的浓度:0.052 (3)0.4的浓度:0.105 (4)0.6的浓度:0.171 (5)0.8的浓度:0.218 (6)1的浓度:0.275ABS
  得出的公式为:C=3.59ABS+0.00
  测量样品:ABS=0.027  由仪器读出的浓度为:0.107     
                        由公式反算为:0.097            相差10%.

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cba5716029
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这是由于标准浓度的吸光度有误差造成的。理论上浓度增加一倍,吸光度也应增加一倍。
cba5716029
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你的回答我不够满意,仪器做出的标准曲线是:相关性为0.994.
但我把标准曲线的浓度值改为:0,1,2,4,6,10后相关性一样,但测量的样品浓度值和用公式反算的浓度值就只相差0.002的浓度.

                          请分析下:
wangyh186
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呵呵,看来这位还挺认真的。我认为主要是你的样品吸光度太低,落在标准曲线下半部分,因此偏差较大。最好让样品吸光度落在曲线中间,这样的话定量准确度较高。这下满意不。
wangyh186
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原文由 cba5716029 发表:
你的回答我不够满意,仪器做出的标准曲线是:相关性为0.994.
但我把标准曲线的浓度值改为:0,1,2,4,6,10后相关性一样,但测量的样品浓度值和用公式反算的浓度值就只相差0.002的浓度.

                          请分析下:

你说的好像不对吧。你如果把标准为10,浓度增大了十倍,但是吸光度肯定不可能增大十倍。
zam0825
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原文由 cba5716029 发表:
你的回答我不够满意,仪器做出的标准曲线是:相关性为0.994.
但我把标准曲线的浓度值改为:0,1,2,4,6,10后相关性一样,但测量的样品浓度值和用公式反算的浓度值就只相差0.002的浓度.

                          请分析下:

很多情况下,浓度曲线只在一定范围内呈线性,你应该找到这个范围后在这个范围内测试。
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