紫外可见分光光度计(UV)

主题:【求助】蛋白质在紫外可见光波长范围内是否有明显吸收

浏览0 回复3 电梯直达
sukailiang
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大家好! 我初学使用紫外可见分光光度计,有一些问题想请教一下大家.望大家不吝赐教!
  我用紫外可见分光度计在波长为190~400nm扫描蛋氨酸,想确定其最大吸收波长.但是发现吸收峰并不明显,从190~230吸收逐渐下降,之后就像基线一样平缓,这样的图谱怎样来确定其最大吸收波长呢. 谢谢各位!
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zam0825
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很多蛋白质在280nm有吸收峰,当然有些蛋白质在其他波长也有吸收。你可以改变pH值检测或低温检测,有些蛋白质吸光度会有明显增加,具体你自己摸索一个合适的条件。可以参考一下郭尧君的“分光光度技术及其在生物化学中的应用”一书。
tianru的爸爸
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蛋白质的紫外吸收是因为蛋白质所含的芳香族氨基酸(色氨酸、酪氨酸、苯丙氨酸)在280nm附近有吸收。
sukailiang
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谢谢大家.我作的是蛋氨酸,没有苯环,有羰基存在,应该在紫外有吸收. 图谱中在280nm无吸收,只是在190~230nm之间有较大较宽的吸收,无法找出最大吸收波长.我想把图没法复制进来.我再换换条件试试了.
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