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液相色谱（LC）
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主题：【原创】HPLC 计算结果重复性差

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luofu
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发表于：2008/04/25 08:46:51 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
各位前辈:
  小女子这里给大家问安了!我用的液相色谱是刚买的。
  这几天我一直做样品，可是结果一直不理想。一开始仪器出的峰面积很长时间才能稳定下来，大约得进样15次之多，保留时间还可以。以后样品峰面积总是上下波动，重复性很差，根本没法计算结果。不知道是检测器有问题，还是色谱柱有问题呢？基线挺稳的。
  我以前用同样的方法做过别的液相色谱，峰面积的重复性很好。我已经按照仪器的操作规程在做了 ，实在不知道这是怎么了．各位前辈帮帮忙吧，在下感激不尽！
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2008/4/25 21:50:34 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
导致重现性不好的主要原因是进样体积有问题，您使用的是什么样的进样器？您可以在进样上查查原因。其次还有您的流动相的稳定性、室内环境对检测器的影响等等……
　　希望您的问题早日解决。
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风烟
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2008/4/28 21:27:25 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
在我们这一若是重现性不好多数是进样器造成的，我用的Waters的，不过液相色谱多大同小异。
若基线挺好，保留时间的重现性也不错的话，我感觉泵和检测器关系不大，还应该是进样量的控制问题，要不您还是问一下导津公司的工程师吧。
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yhsun
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2008/4/28 23:23:45 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
建议列出仪器品牌、配置、故障现象，这样才能给出有用的建议。
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2008/4/28 23:39:51 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊

1. 看样品情况，是不是稳定，一个样品进样15次，需要多长时间？能不能保证样品本身不变？
2. 连续进样6次，如果峰面积的RSD小于1.5%说明仪器基本没问题，通常我们的都在0.2%左右。
3. 色谱的响应情况如何，会不会太低？噪声是否较大？是否影响积分？
4. 换上其他的样品和流动相，进行测定，是否出现相同的问题？
5. 注意操作环境和色谱柱的温度保持恒定。
6. 如果是新的仪器，转子密封垫应该不会有问题，但是，如果上述问题排除了仍无法找到答案，建议联系售后上门查找原因。
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