原文由 sunxiaoping2005 发表:
我现在正在做生物样本的浓度检测,所用仪器是菲尼根的半定量质谱检测仪器,血浆处理方法是甲醇沉淀蛋白后进样。进了两套标准曲线,一套是在空白血浆中的标准曲线,一套是刚配制好的标准溶液,但是每一套标准曲线都不好,曲线一共设置8个点,前5个点的线性非常好,但是低浓度的三个点已经重复了好几遍了,其响应与浓度没有任何关系,比例关系也比较乱,检测过程中是加了内标的,而且内标的响应也一致,没有较大变化。还有,最低血浆浓度设在800ng/ml,实际进样浓度稀释5倍。请各位同仁指点下我怎么来分析原因,及可能采取的措施呢。
原文由 sunxiaoping2005 发表:
我现在正在做生物样本的浓度检测,所用仪器是菲尼根的半定量质谱检测仪器,血浆处理方法是甲醇沉淀蛋白后进样。进了两套标准曲线,一套是在空白血浆中的标准曲线,一套是刚配制好的标准溶液,但是每一套标准曲线都不好,曲线一共设置8个点,前5个点的线性非常好,但是低浓度的三个点已经重复了好几遍了,其响应与浓度没有任何关系,比例关系也比较乱,检测过程中是加了内标的,而且内标的响应也一致,没有较大变化。还有,最低血浆浓度设在800ng/ml,实际进样浓度稀释5倍。请各位同仁指点下我怎么来分析原因,及可能采取的措施呢。
原文由 sunxiaoping2005 发表:
我说的实际问题是标准曲线高浓度区域的五个点线性较好,但是低浓度区域的三个点线性不好,事实上我试过的血浆浓度从15ng/ml到100μg/ml,浓度倍数关系是2倍,具体方法是将标准溶液依次按5倍浓度等比稀释,取100微升空白血浆,分别取10、20微升稀释后的标准品系列稀释浓度,这样血浆浓度是按照2.5倍关系等比下降。血浆处理采用400微升甲醇沉淀蛋白,进样体积5微升。结果是12个浓度系列中高浓度区域5个点线性良好,但是低浓度区域的峰面积比不成比例增加,没有什么规律,总体来说低浓度区域的点较整条标线,浓度偏高。但单独将低浓度区域的点做标准曲线时,线性仍然不好,回算后每点浓度的准确度也较差。