主题：求 烟酸血样测定LC-MS/MS方法

原文由 dingcungang 发表:
最近在做烟酸血样测定方法学研究，碰到一些棘手的问题，希望高手不吝指教，谢谢！ 
  我参照文献用的氰基柱，甲醇：水：甲酸＝90：10：0.2，保留时间约3.6min ，为死时间的2－2.5倍。对照品响应和峰形都很好，但是进生物样品（ 我采用的是甲醇蛋白沉淀法，吹干，复溶法）后保留时间逐渐变短，且响应迅速降低。信号变化较大，基本做不了基质效应。
  尝试过增加酸的量，换用乙酸，或采用乙腈体系没有效果。
  文献有用固相萃取的，我想尽量避免用，毕竟处理起来比较慢。
有做过烟酸的ＳＤＪＭ吗？　拜托了！

原文由 dingcungang 发表:
最近在做烟酸血样测定方法学研究，碰到一些棘手的问题，希望高手不吝指教，谢谢！ 
  我参照文献用的氰基柱，甲醇：水：甲酸＝90：10：0.2，保留时间约3.6min ，为死时间的2－2.5倍。对照品响应和峰形都很好，但是进生物样品（ 我采用的是甲醇蛋白沉淀法，吹干，复溶法）后保留时间逐渐变短，且响应迅速降低。信号变化较大，基本做不了基质效应。
  尝试过增加酸的量，换用乙酸，或采用乙腈体系没有效果。
  文献有用固相萃取的，我想尽量避免用，毕竟处理起来比较慢。
有做过烟酸的ＳＤＪＭ吗？　拜托了！

原文由 elevern 发表:

原文由 dingcungang 发表:
最近在做烟酸血样测定方法学研究，碰到一些棘手的问题，希望高手不吝指教，谢谢！ 
  我参照文献用的氰基柱，甲醇：水：甲酸＝90：10：0.2，保留时间约3.6min ，为死时间的2－2.5倍。对照品响应和峰形都很好，但是进生物样品（ 我采用的是甲醇蛋白沉淀法，吹干，复溶法）后保留时间逐渐变短，且响应迅速降低。信号变化较大，基本做不了基质效应。
  尝试过增加酸的量，换用乙酸，或采用乙腈体系没有效果。
  文献有用固相萃取的，我想尽量避免用，毕竟处理起来比较慢。
有做过烟酸的ＳＤＪＭ吗？　拜托了！

烟酸不是很好做，质谱灵敏度也不是太高。氰基柱算是极性柱，这么大的甲醇的话，蛋白不一定能冲干净。响应降低，应该是蛋白的关系，但不至于保留时间也跟着变化，说明你的液相条件不是很适合。2%的甲酸，pH值已经<1.5了，不能再加酸了。你最好调整一下流动相，用甲酸-甲酸铵体系或者是醋酸-醋酸铵体系。水相放到30%左右，样品和内标出峰后加个小梯度，把甲醇提到100%，冲一下。如果嫌这样子保留时间偏长。将色谱柱换成苯基柱或是C8柱就可以走等度。C18柱的话，烟酸没什么保留，应该要走梯度

原文由 dingcungang 发表:
最近出差　目前没什么进展