主题：【资料】测定总氮时应注意的几个问题

2 无氨水的制备
实验过程对水的要求非常严格，普通的蒸馏水往往还达
不到实验要求。这时需再做二次加工以得到无氨水。在用
蒸馏法制备无氨水时，GB11894--89中指出：“弃去前50ml
馏出液，然后将馏出液收集在带有玻璃塞的玻璃瓶中”。根
据笔者的工作经验，仅仅弃去前50rnl馏出液是不够的。举
个例子说，如果蒸出1000ml的无氨水，先前蒸出的20Oral馏
出液都要弃去，最后蒸出的200ml馏出液也要弃去，只保留
中间蒸出的无氨水待用，否则，重蒸无氨水的空白值往往还
不如制备之前的普通蒸馏水空白值好。
3 实验室环境
总氮的分析应在无氨的实验室环境中进行，室内不应含
有扬尘、石油类及其它的氮化合物，绝对不能在分析氨氮等
氮类项目的实验室中做总氮项目的分析，所使用的试剂、玻
璃器皿等也要单独存放，避免交叉污染，影响空白值。
4 玻璃器皿的洗涤
所使用的玻璃器皿应先用(1+9)盐酸浸泡后，再用无氨
水冲洗数次才能使用，否则，也会造成空白值偏高或平行性
较差的情况。
5 消解温度、压力的控制
对于使用医用手提蒸气灭菌器的实验室，因测定压力为
1．1—1．4kg／cm2 ，温度为120℃ 一124℃ ．此时可以安装一个
稳压器，将压力控制在该范围，这样就省去了通过人为切断
电源控制的麻烦，稳定且省力。消解时，GB11894-89中要求达
到规定温度压力后即开始计时，而笔者的经验是，达到规定温度
压力后应当先放气使压力表指针回零，再次达到规定温度压力
后再计时。或者直接打开放气阀加热一段时间，待蒸气灭菌器
内的冷空气被彻底赶尽、放出热蒸气后再关闭放气阀消解，并且
将消解温度控制在123 ℃ ，这样测定结果最为理想。
6 比色时的注意事项
该项目的测定涉及两个波长(220nm和275nm)，有条件
的实验室可采用双光路紫外分光光度计，其优点是方便快
速、可以避免反复调整波长产生测量误差，皿间误差也能自
动修正。如果没有双光路的光度计，建议在测定完一组样品
的同一波长后，再调整到另一波长，统一测定，不要测完一个
样品的两个吸光度后再换另一个样品，这样反复调整波长会
引起一定的测量误差。

7 试剂的选择
碱性过硫酸钾消解紫外分光光度法测定总氮的过程中，
过硫酸钾是至关重要的试剂。首先，试剂的纯度关系到空白
值的高低、测定结果的准确度。一般普通分析纯过硫酸钾的
总氮含量最高不超过0．005％ ，但由于试剂质量存在差异，有
些厂家、批次的试剂含氮量常常达不到这个要求，致使空白
值偏高。另外，分析纯氢氧化钠的氮化合物含量虽然大大低
于过硫酸钾的含氮量，但也要仔细选择。笔者在工作中就曾
遇到过将过硫酸钾溶液与氢氧化钠溶液混合成碱性过硫酸
钾溶液时，竟散发出氨水气味的现象，这说明试剂的纯度不
够。因此，有条件的话建议使用优级纯或基准试剂，尽量降
低试剂中的含氮量，从而降低实验空白值。
8 实验用水及试剂的质量检验
若实验的空白值不够理想，则需要对实验用水及试剂进
行检验，以选择出含氮量最低的水和试剂，获得理想的空白
值。笔者的经验是，若每换一种水、每换一个厂家、一个批次
的过硫酸钾、氢氧化钠试剂就全过程做一遍总氮，将是相当
麻烦的，而且最终还往往难以得出结论。以下是笔者在工作
中总结出的一点简便的方法，仅供参考。
8．1 水的检验
将所有待选的实验用水分别装入石英比色皿中，分别在
220nm和275nm波长处测其吸光度，按A220nm～2A275nm
对吸光度进行修正，以修正后吸光度值最小的水为实验用水。
8．2 试剂的检验
将所有待检的过硫酸钾、氢氧化钠按其在实验时消解定
容后的溶液中的含量分别配成相应浓度的溶液，以此溶液作
为样品，分别测定其氨氮、硝酸盐氮的吸光度，择其吸光度最
低者而用即可，若有必要，也可进一步计算其氮含量。这里
有必要强调的是硝酸盐氮的检验。若采用酚二磺酸分光光
度法测定，步骤稍为繁琐，建议可以参考《水和废水监测分析
方法>第四版中提到的紫外分光光度法，会更简便。前面提到的
配好后呈氨水味的碱性过硫酸钾溶液，就是通过试剂检验，确定
是其中的过硫酸钾试剂氨氮含量太高而决定将其弃用的。

学习了，给我们这些刚上路的新手指出了一条捷径啊！

厉害