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主题：【求助】关于荧光物质发光的问题？请达人指导

浏览0 回复7 电梯直达
kinfeng
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发表于：2009/12/24 10:20:49 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
各位老师、达人们好，本人是从事医疗检测仪器研发工作的，涉及到荧光检测方面，先就一些问题请教各位，望不吝指教，谢谢！
  1、我想问问荧光物质发光是跟荧光物质溶液的浓度有关呢？还是总质量有关？比如说，我们要检测Xmg/L的物质，取其200ul（总量相当于200*X，单位省）跟取其300ul（总量增加）有没有区别？
  2、荧光物质的激发跟其环境溶液（或体系，离子环境？）有关吗？我试过将同样的物质溶在离子溶液中跟纯水中，结果是在纯水中无荧光激发，而在离子环境中就能检测。
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2009/12/25 8:19:07 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
发射光谱峰位跟溶液的量无关，但跟光程、浓度有关，可以根据朗伯比尔定律归一化；荧光跟溶剂、物质本身状态、温度等都有关。粒子条件下就有可能与物质作用产生很强的荧光，这可以用于荧光检测。
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happydog2004
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2010/2/10 8:51:15 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
同意楼上的
  荧光物质发光
1.内因：主要与物质的分子结构（发光团、大共轭、刚性平面结构等）有关；与物质浓度有关，浓度过大会产生“荧光猝灭”，与荧光物质溶液的体积量多少无关；
2.外因：主要受荧光物质所处溶液环境pH值的影响明显，纯水中不能维持稳定的、适宜的pH环境，所以荧光现象不明显
  建议楼主看《荧光分析法》（第三版），比较经典的一部荧光书籍
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kinfeng
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2011/8/16 17:08:58 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
虽然过了这么长时间，还是要谢谢回帖的两位的！
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kinfeng
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2011/8/16 17:12:10 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
有个新问题：分光光度计有标准的（公式）检测直径、检测方向，可以很好地检测试剂或仪器，但荧光如何来进行标准化检测，激发方向跟检测方向、光程等如何设定才算的标准的呢?
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sunny04141125
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2011/9/23 14:23:33 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
1、有区别，因为你的样品量大了，对应的荧光强度也会增大。
2、楼主说的在不同溶液中，样品的荧光效应不同，我认为是溶液对你样品的荧光效应有很明显的影响。
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夕阳
anping
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2011/9/25 22:16:59 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 kinfeng(kinfeng) 发表:
各位老师、达人们好，本人是从事医疗检测仪器研发工作的，涉及到荧光检测方面，先就一些问题请教各位，望不吝指教，谢谢！
  1、我想问问荧光物质发光是跟荧光物质溶液的浓度有关呢？还是总质量有关？比如说，我们要检测Xmg/L的物质，取其200ul（总量相当于200*X，单位省）跟取其300ul（总量增加）有没有区别？
  2、荧光物质的激发跟其环境溶液（或体系，离子环境？）有关吗？我试过将同样的物质溶在离子溶液中跟纯水中，结果是在纯水中无荧光激发，而在离子环境中就能检测。


试着回答啊：
（1）一般而言是与浓度有关的，应为激发光为一个很小的光束，仅仅照射到样品的很小一部分，故产生的荧光主要是这一部分。此外总质量与浓度也是正比关系吧？
（2）首先要搞清离子溶液是什么，楼主测到的是样品的荧光还是溶剂的荧光？如果不断改变激发波长的频率，而露珠所测到的风不发生位移的话，这个峰才是荧光峰。此外楼主介绍的过于简单些了，可能我回答的不全面。请楼主补充吧？
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Insm_54a25aaf
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2019/11/16 9:30:17 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由happydog2004(happydog2004)发表:同意楼上的
  荧光物质发光
1.内因：主要与物质的分子结构（发光团、大共轭、刚性平面结构等）有关；与物质浓度有关，浓度过大会产生“荧光猝灭”，与荧光物质溶液的体积量多少无关；
2.外因：主要受荧光物质所处溶液环境pH值的影响明显，纯水中不能维持稳定的、适宜的pH环境，所以荧光现象不明显
  建议楼主看《荧光分析法》（第三版），比较经典的一部荧光书籍
我的标准品在水中有明显的荧光但是激发与发射图谱不能呈现镜面关系(谱形一样但是高度差别很大)，这是为什么呢？我应该改变什么条件吗
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