主题：【讨论】便携式近红外定量检测酶力肽的蛋白质含量的模型建立及问题

原文由 闲鹤野云(ruojun) 发表:
最近使用新买的便携式近红外设备，对酶力肽进行了蛋白质的湿化学方法检测，然后对样品光谱进行采集，通过定量分析模型的建立、优化，尝试对样品进行回归测定。

蛋白质采用凯氏定氮法，按同一标准，粉碎蛋白有一定差异的样品（同一粉碎机、粉碎时间），测定出样品蛋白质含量的真值：70-90%（主要是含水量不同造成的差异）。

光谱采集分粉碎样品和原始样品两种类型，分别建模。

结果：总体不错。但有几个问题需要大家注意。

1. 粒度对模型和检测结果影响非常大，一定要粉碎一致。不同粒度下建立的模型检测结果误差很大，尤其是未粉碎的，误差更大。粉碎的样品结果一致性很好

2.由于采用漫发射光谱，光源直接贴近样品照射，同一位点进行定量检测时如果不移动，每次的检测结果都会变化，但按绝对值增大约1%的幅度增加。我感觉可能与长期一直照射的情况下，样品内部温度发生变化导致水分发生移动，或漫反射的能量加强导致检测结果不稳定。但哪个是主要原因呢？？？

原文由 王俊强 聚光科技(jackey27) 发表:

原文由 闲鹤野云(ruojun) 发表:
最近使用新买的便携式近红外设备，对酶力肽进行了蛋白质的湿化学方法检测，然后对样品光谱进行采集，通过定量分析模型的建立、优化，尝试对样品进行回归测定。

蛋白质采用凯氏定氮法，按同一标准，粉碎蛋白有一定差异的样品（同一粉碎机、粉碎时间），测定出样品蛋白质含量的真值：70-90%（主要是含水量不同造成的差异）。

光谱采集分粉碎样品和原始样品两种类型，分别建模。

结果：总体不错。但有几个问题需要大家注意。

1. 粒度对模型和检测结果影响非常大，一定要粉碎一致。不同粒度下建立的模型检测结果误差很大，尤其是未粉碎的，误差更大。粉碎的样品结果一致性很好

2.由于采用漫发射光谱，光源直接贴近样品照射，同一位点进行定量检测时如果不移动，每次的检测结果都会变化，但按绝对值增大约1%的幅度增加。我感觉可能与长期一直照射的情况下，样品内部温度发生变化导致水分发生移动，或漫反射的能量加强导致检测结果不稳定。但哪个是主要原因呢？？？

可能的问题，个人看法

1、粒度均匀肯定更好，而且达到细化更理想，因为有间隙。
    还有你的便携式仪器的光斑应该不是很大，采集的样本代表性一致性可能不是很怜惜。
    传统近红外仪器，几个厂家都是旋转样品盘，能够均匀化采集光谱。

2、本身近红外统一地点检测，是会存在一定的波动，这个符合光谱预测的数学理论，关键是你的模型预测偏差是否大了。
      温度是会有影响，但是检测快的化，基本没大问题。液体物品，温度有些时间检测时做成恒温测定。