主题：【讨论】检测食品中氨基酸时，最适合的液相色谱是什么型号？

原文由 nj727(nj727) 发表:
双泵高压加柱后衍生，我听说AT和岛津都有这方面液相。

原文由 xietg(xietg) 发表:
HPLC来做氨基酸，需要衍生的，对人的要求非常高，即使具有非常丰富的经验，衍生后仍不可避免的存在问题。用衍生法对仪器型号没啥要求，关键看你喜欢用哪个厂家的了，注意一般C18的就可以。
HPLC法衍生的重现性不大好。

原文由 xietg(xietg) 发表:
简单的说下HPLC柱前衍生法的缺点：
1、OPA法（邻苯二甲醛）
最大的不足之处是：做全分析时需配以其他技术一起使用，方可与带有仲氨基团的氨基酸进行反应。赖氨酸及胱氨酸衍生物荧光较弱，灵敏度低。因为OPA是快速反应剂，有些氨基酸反应极其不稳定，特别是甘氨酸、赖氨酸衍生物的信号衰减很快，一天变化很大。从以往我们做的实验来看此方法的变异系数CV%一般为5％左右，个别的氨基酸如组氨酸可达9%左右，尤其对带有盐分的饲料氨基酸类样品特别不适合，因样品中带有的盐分直接影响衍生（紫外法基线不好）。

2、PITC法（异硫氰酸苯脂）
此方法的重现性明显低于茚三酮法，最大的缺点是：一个组分衍生后可生成2个以上的衍生物，而且和其它组分峰重叠，灵敏度比较低。由于有残留的衍生剂，柱效与柱寿命降低很快（做200左右样品），变异系数在4%左右，也偏大，个别氨基酸如组氨酸可达8%，某些氨基酸在24小时内即降解。

3、2、4-二硝基氟苯法
此方法是比较常见的液相测定方法，最大的缺点是衍生剂峰比较大，对柱子危害比较厉害。组氨酸分离不好、组氨酸的二级衍生物与丝氨酸重叠，另一个峰柱效降低时完全溶入到前面苯丙峰中，直接影响定量，日间变化比较大。

所以，如果您是为了对外出具报告，则必须采用柱后衍生法，也就是茚三酮衍生法，否则出具的报告不具有法律效力，也不符合相关标准。柱后茚三酮法不论是从灵敏度还是重现性以及结果的准确性上都比柱前衍生要好很多。
柱前衍生法也就是HPLC法适合做研究用，比如研究如何用HPLC来检测氨基酸，或者是对结果要求不是很高的用户，只需要知道里面有没有即可，不需要结果非常准确，另外就是内部质量管理了，既然是内部质量管理，那么所出具的结果一般是不被认可的。
专用的氨基酸分析仪一次性投入稍大，但是对于使用者来说，则省去很大的麻烦，使用者只需要把样品提取出来，放入到仪器的自动进样器里，其余的分离、衍生、检测等工作全部由仪器代为完成，只需要等待最后哦取结果即可。专用仪器的分析时间要较HPLC短，测定结果的准确性也要较HPLC法好许多。

如果你只是为了内部研究，建议你们使用柱前衍生法，但是柱前衍生的试剂包并不便宜且还存在前面所提到的问题。如果有充足的预算，建议购买专用的氨基酸分析仪，虽然投入大点，但是省事、省力哦，O(∩_∩)O~

不知道我理解的是否对错，还请各位专家指正，我也顺便多学习点，谢谢！