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主题：【求助】荧光扫描茶汤遇到的问题

浏览0 回复8 电梯直达
hanzhiyi2004
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发表于：2010/07/15 17:17:33 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
我们实验室用的是一台瓦里安的CARY ECLIPSE荧光分光光度计，我的实验材料是茶叶（干茶叶用100摄氏度的蒸馏水浸泡10分钟之后放到石英比色皿中进行扫描），不过我扫描的三维光谱，得到的峰很奇怪
bottom
1：茶汤扫描出来的光谱，只有这个一个物质峰，而且漂移很厉害，从400nm开始，随着激发波长的增加，物质的最佳发射波长值也逐渐增加。而且这个峰很大，另外两个应该出来的峰反而由于值太小就显现不出来了，第一个图是我采集的图谱，下图是一个文献上采集茶汤的图。请有荧光经验朋友帮忙，谢谢
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teng1986
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2010/7/15 21:54:54 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
个人认为，那些强尖峰是水分子的瑞利散射，而样品峰没有出来。
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andrewguan
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2010/7/15 22:32:23 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
你那扫描出来的能叫三维谱图吗？
呵呵
都是杂散信号
你的问题是1、发射波长随着激发波长在漂移，从而可以判断所得的信号是瑞利散射，及其倍频峰  2、由于你所测瑞利散射及倍频信号太强，因而完全干扰了样品的荧光峰

建议1、加滤光片截除  2、换激发波长  3、若要做三维谱图，建议换日立的仪器

文献给的图非常漂亮
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锐飏
tmxk999
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2010/7/16 12:16:09 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
建议你更换一下扫描的条件，ex范围设置为320nm到470nm，发射范围从375nm到550nm.然后再进行PL扫描
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hanzhiyi2004
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2010/7/16 15:52:21 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 andrewguan(andrewguan) 发表:
你那扫描出来的能叫三维谱图吗？
呵呵
都是杂散信号
你的问题是1、发射波长随着激发波长在漂移，从而可以判断所得的信号是瑞利散射，及其倍频峰  2、由于你所测瑞利散射及倍频信号太强，因而完全干扰了样品的荧光峰

建议1、加滤光片截除  2、换激发波长  3、若要做三维谱图，建议换日立的仪器

文献给的图非常漂亮

谢谢你给的这么多的建议，我后来直接扫描蒸馏水，也出现类似的峰，但是强度值很低，只有不到10，（而茶汤样本值很大），为什么只扫描蒸馏水的时候瑞利散射就不明显啊？
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andrewguan
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2010/7/20 17:49:48 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
光电倍增管的信号跟测量时的条件有关
如电压、狭缝等
所以你只扫描蒸馏水的时候是否条件一样？
另外荧光跟紫外不一样，不要以为做蒸馏水就能扣背景
荧光只有真谱和表观谱
扣背景没意义
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fragr
FRAGR
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2010/7/24 11:30:03 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 hanzhiyi2004(hanzhiyi2004) 发表:
原文由 andrewguan(andrewguan) 发表:
你那扫描出来的能叫三维谱图吗？
呵呵
都是杂散信号
你的问题是1、发射波长随着激发波长在漂移，从而可以判断所得的信号是瑞利散射，及其倍频峰  2、由于你所测瑞利散射及倍频信号太强，因而完全干扰了样品的荧光峰

建议1、加滤光片截除  2、换激发波长  3、若要做三维谱图，建议换日立的仪器

文献给的图非常漂亮

谢谢你给的这么多的建议，我后来直接扫描蒸馏水，也出现类似的峰，但是强度值很低，只有不到10，（而茶汤样本值很大），为什么只扫描蒸馏水的时候瑞利散射就不明显啊？


茶叶浸出物的散射导致的信号响应强于直接的蒸馏水。
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zwyu
zwyu
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2010/7/29 22:55:30 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
这个帖子仔细品品有点意思

原文由 fragr(FRAGR) 发表:
原文由 hanzhiyi2004(hanzhiyi2004) 发表:
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你那扫描出来的能叫三维谱图吗？
呵呵
都是杂散信号
你的问题是1、发射波长随着激发波长在漂移，从而可以判断所得的信号是瑞利散射，及其倍频峰  2、由于你所测瑞利散射及倍频信号太强，因而完全干扰了样品的荧光峰

建议1、加滤光片截除  2、换激发波长  3、若要做三维谱图，建议换日立的仪器

文献给的图非常漂亮

谢谢你给的这么多的建议，我后来直接扫描蒸馏水，也出现类似的峰，但是强度值很低，只有不到10，（而茶汤样本值很大），为什么只扫描蒸馏水的时候瑞利散射就不明显啊？


茶叶浸出物的散射导致的信号响应强于直接的蒸馏水。
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2010/7/29 22:56:15 Last edit by zwyu
夕阳
anping
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2010/8/1 15:51:14 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
楼主最好将仪器的所有条件传上来（例如仪器的原始报告）以便分析。

此外，关于茶叶的激发与发射波长，在文献中给出的是多少？你上传的文献三维图谱看不清楚。

还有你做的图谱也不像三维图谱。
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2010/8/1 15:55:01 Last edit by anping
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