含量测定方法(归纳为两类):
1 测定总甙含量
甜菊甙类在酸性溶液中加热水解产生糖和甜菊甙元,甜菊甙元受热后发生分子重排转变成异甜菊甙元。异甜菊甙元是一种甾酮酸,具羧基和羰基,可利用这两个基测出甜菊总甙的含量。
1.1 中和法
异甜菊甙元具羧基呈酸性,可使其溶解在甲醇或乙醇中,用KOH或NaOH标准液进行中和滴定。
1.2 重量法
异甜菊甙元尚具有羰基特性,可在酸性溶液中与2,4-二硝基苯肼反应,生成苯腙衍生物从水中析出,干燥称重,可换算成总甙含量。
1.3 比色法
利用糖类在一定条件下与蒽酮作用产生绿色的专有反应,将甜菊甙类在酸性溶液中与蒽酮加热产生绿色反应,再变成兰绿色,于620mm处进行比色测定,以甜菊甙为标准品测定样品中总甙含量。
2 测定各甙含量
2.1 薄层层析法
将甜菊提取液点样于硅胶G板上,经氯仿—甲醇—水(35∶20∶1)展开,洗脱,用蒽酮—硫酸显色在620mm处,测定甜菊甙单体含量。也有人使用薄层扫描仪测定了甜菊甙和莱鲍迪甙A的含量。
2.2 高效
液相色普法
采用高效
液相色普法以氢基键合相为固定相,乙腈—水(80∶19)为流动相,分离出甜菊甙、莱鲍迪甙A和莱鲍迪甙C,并进行测定。