主题：【分享】苏丹红检测

苏丹红毒性、食品污染与检测

概要

苏丹红是一种化学合成的红色偶氮染色剂。主要包括Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ型。常用作工业染料，如溶剂、油、蜡、汽油的增色剂及鞋、地板等增光剂。因其具有致癌性、致突变性和致敏性，全球多数国家都已禁止其作为食品色素添加到食品中。但由于其化学性质稳定，故一些食品加工企业为使“麻油”等食品长期保持鲜红颜色，竟在诸多食品中添加了苏丹红。至目前，国内外披露的添加了苏丹红的食品种类和数量骇人听闻，竟然一些知名企业也不乏其中。苏丹红对食品污染的广泛性已成为普遍关注的课题。

目前，食品中苏丹红测定，国外多采用高效液相色谱法。根据我国当前食品卫生监督检验的需求，我国近期亦颁布了应用高效液相色谱仪测定食品中苏丹红的标准检验法。

我们采用L600高效液相色谱仪进行了食品中苏丹红测定的应用研究，并进行了样品测定。现将苏丹红毒性、食品污染影响及检测结果报告如下。

毒理学特性

研究表明，进入机体内的苏丹红可以代谢成相应的胺类，其致癌性和致突变性都与这些胺类有关。

苏丹红Ⅰ:国际癌症研究机构（IAKC）已将苏丹红Ⅰ列为三类致癌物，既动物致癌物，可致动物患肝、膀胱、脾脏肿瘤；在人类肝细胞研究中也显示出可能致癌的特性。遗传毒性研究表明，苏丹红Ⅰ具有致突变作用。其代谢产物有苯胺和1-胺基2-萘酚。前者为三类致癌物，具有遗传毒性；吸入人体可引起神经系统和心血管系统受损，以至导致不孕症；后者可诱发基因突变，小鼠患膀胱癌。

苏丹红Ⅱ:苏丹红Ⅱ及其在体内代谢物2，4-二甲基苯胺均为三类致癌物。毒理学实验结果显示，可使小鼠肺癌发生率显著升高。

苏丹红Ⅲ:苏丹红Ⅲ属三类致癌物。其在体内代谢可产生1-氨基-2 萘酚、苯胺、对苯二胺、4 氨基-苯基偶氮-2 萘酚、邻-甲苯胺、邻-氨基偶氮苯。后两者为二类致癌物。毒力学实验显示，苏丹红Ⅲ可诱发大鼠肝癌。

苏丹红Ⅳ:苏丹红Ⅳ属三类致癌物。体内代谢可产生4-氨基-2-甲基偶氮-2-萘酚、2，5-二氨基甲苯、1-氨基-2 萘酚、邻-甲苯胺和邻-氨基偶氮甲苯。其中后两者为二类致癌物。毒理学研究证实，邻-甲苯胺可诱发大鼠多器官肉瘤、如纤维肉瘤、骨肉瘤；邻-氨基偶氮甲苯可诱发膀胱癌。

实验部分

1.原理：样品经溶剂提取，固相萃取净化后，采用C18色谱柱，高效液相色谱仪（紫外-可见光检测器）进行测定分析，外标法定量计算。

2．仪器

L600高效液相色谱仪（梯度洗脱装置，紫外一可见光检测器）

柱恒温箱

在线脱气机

固相萃取装置及萃取小柱(Cleanert C18)

超声波清洗器

旋转蒸发仪

离心机

溶剂过滤器及虑膜

3.试剂

正己烷 A．R．

丙酮 色谱纯

甲酸 A．R.

乙睛 色谱纯

三氧化二铝(A1203)，层析用中性，100—200 目

纯水 重蒸馏水

苏丹红I、II、III、Ⅳ标准品

苏丹红I、II、III、Ⅳ标准储备液根据苏丹红纯度折算称量，用正己烷溶解并配制成40μg／mL

4.色谱条件

色谱柱：Venusil XBP C18柱(4.6nm×250nm，5.0um)

检测波长：①^# :478nm

          ②③④^#:520nm

流动相：A泵: 0.1%甲酸水溶液 : 乙腈  85% : 15%

        B泵: 0.1%甲酸乙腈溶液 : 丙酮  80% : 20%

流速：1ml/min

柱温：40℃

梯度表:

苏丹红I、Ⅱ、III、Ⅳ标准溶液色谱图：

5.线性关系：

标准曲线配置：分别配置浓度为0、0.1、0.2、0.5、2.0、5.0ug/ml的苏丹红混合溶液,检测范围内线性关系均良好。

苏丹红Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ的相关系数分别为0．99977、0．99950、0．99946、0．99934。

标准曲线图：

6.计算

以保留时间定性，峰面积定量，参照标准曲线，外标法计算。

7.灵敏度试验

按以上步骤操作，苏丹红最低检测浓度为0．001μg/kg。

8.重现性试验

按试验方法将苏丹红标准混合液(5μg/mL)连续测定6次，苏丹红测定的保留时间相对标准偏差为0.32%～0.85%，峰面积相对标准偏差为0.46%～1.02%。

9.结论

l        苏丹红的致癌性、致突变性及对食品的人为污染应当受到更广泛的关注，必须加强对食品中苏丹红的卫生学监督与检测。

l        L600高效液相色谱仪检测食品中苏丹红具有灵敏、准确、稳定性好等优点，其灵敏度高，最低检测浓度达0.001μg/kg,稳定性好，苏丹红测定的保留时间相对标准偏差为0.32%～0.85%，峰面积相对标准偏差为0.46%～1.02%；梯度洗脱基线平直，无漂移，噪声小。样品回收率达85%。

l        该方法适用于食品生产企业、质量监督检验机构、疾病预防控制中心、商检等实验室检测食品及相关产品中的苏丹红。