化妆品中甲醇检测方法验证
1 实验室内部验证
经过对化妆品样品前处理方法的确立,分析条件的优化,最终建立了化妆品中甲醇的
气相色谱检测方法。方法学验证数据见表1和表2
表1 实验室内部特异性
实验条件 内容 结果
气-液平衡法(分流比20:1,取样1.0g)
直接法(分流比50:1,取样2.0g) 空白溶剂(无甲醇乙醇溶剂)
样品6种(洗发露、凝胶、膏霜、化妆水、发胶、香水)
样品+甲醇标准6种(洗发露、凝胶、膏霜、化妆水、发胶、香水)
无干扰
蒸馏法(分流比50:1,取样10.0g) 空白溶剂(无甲醇乙醇溶剂)
样品2种(洗发露、发胶)
样品+甲醇标准2种(洗发露、发胶)
表2 实验室内部验证内容
内容 气-液平衡法
分流比20:1, 取样1.0 g 直接法
分流比50:1, 取样2.0 g 蒸馏法
分流比50:1,取样10.0 g 结果
线性范围(g/L) 0.1~4.0 0.02~0.4 0.1~2.0 0.02~4.0
溶液曲线与相关系数 y =1126.7 x+78.663
r =0.9997 y =113.0 x+0.1945
r =0.9998 y =85.398 x-0.0549
r =1.0000 /
基质曲线与相关系数 洗发露 y =1241.4 x +25.857
r =0.9997
凝胶 y =1210.8 x+36.032
r =1.0000
膏霜y =1217 x+45.905
r =0.9996
化妆水y =1196.6 x+18.109
r =1.0000
发胶y =1225.3 x+149.33
r =1.0000
香水y =1201.6 x+44.811
r =0.9998 洗发露 y =123.1 x-0.5199
r =0.9995
凝胶 y =126.8 x-0.3836
r =0.9992
膏霜y =131.9 x+0.2630
r =0.9997
化妆水y =125.3 x-0.8432
r =0.99994
发胶y =111.5 x+2.0155
r =0.9998
香水y =118.4 x+1.0667
r =0.99993 标准溶液
y =68.274 x+1.3032
r =0.9996
发胶
y =72.317 x-1.1932
r =0.9999 /
方法检出浓度RSD
(mg/kg) 20 25 25 /
方法定量浓度(mg/kg) 80 100 100 /
回收率(%) 92.0~105.4 93.4~106.8 101.9~108.4 92.0~108.4
日内精密度(%) 0.85~1.81 0.60~0.89 0.60~0.89 0.60~1.81
日间精密度(%) 1.11~1.80 0.91~0.92 0.91~0.92 0.911~1.80
日内稳定性(%) 0.44~1.03 0.49~1.14 0.49~1.14 0.44~1.14
日间稳定性(%) 1.22~1.25 0.32~0.73 0.32~0.73 0.32~1.25
表1和表2所示,化妆品基质对甲醇测定无干扰,回收率为92.0%~109.0%,日内、日间精密度和日内、日间稳定性RSD<5%,检出浓度、定量浓度、线性方程和相关系数满足测定要求。检测了47批次样品(11类,洗发露、护发素、沐浴液、护肤水、乳液、膏霜、香水、花露水、凝胶、发胶、面膜),结果表明,本方法可行,满足化妆品中甲醇的测定要求。
2 多家实验室方法比对验证
2.1 验证单位
(1) 大连市药检所
(2) 广东省食品药品检验所
(3) 广州市药品检验所
2.2 验证内容
2.2.1 特异性
表3 三家单位特异性验证结果
验证单位 验证内容 气-液平衡法(分流比20:1,取样1.0g)
直接法(分流比50:1,取样2.0g) 结果
大连所
特异性 空白溶剂(无甲醇乙醇溶剂)
样品2种(洗发露、发胶)
样品+甲醇标准2种(洗发露、发胶)
无干扰
广东所
广州所
表3可知,三家验证单位按照已建立的检测方法,对空白溶剂、样品、样品加甲醇标准品进行了分析测定,结果化妆品基质对甲醇的测定无干扰。
2.2.2 线性方程与相关系数
表4 三家验证单位线性方程与相关系数
验证
单位 验证
内容 气-液平衡法
分流比20:1,取样1.0g 直接法
分流比50:1,取样2.0g 蒸馏法
分流比50:1,取样10.0g
大连所
线性
方程
相关
系数 标准液y =2.45×1010 x-4.57×108 r =0.9995
洗发露y =2..35×1010 x-3.96×107 r =0.9997
凝胶y =2..36×1010 x-2.37×108
r =0.9997
膏霜y =2..34×1010 x+2.72×108
r =0.9992
发胶y =2..37×1010 x+5.53×109
r =0.9994
香水y =2..30×1010 x+2.49×109
r =0.9992 标准液y =1.01×105 x-1.24×102
r =0.99998
洗发露y =1.08×105 x+1.53×102
r =0.99996
凝胶y =1.07×105 x+3.70×102
r =0.99990
膏霜y =1.07×105 x-1.74×101
r =0.9997
发胶y =1.12×105 x+8.47×101
r =0.9998
香水y =1.109×105 x-3.85×102
r =0.9998 洗发露
y =6.79×105 x-1.29×102
r =0.99993
广东所 标准液y =3052.5 x+6.9136
r =0.9995
洗发露y =3264 x+131.6
r =0.9993
凝胶y =3590.8 x-133.69
r =0.9998
膏霜y =3165.7 x-28.128
r =0.9991
发胶y =3223.9 x+117.7
r =0.9998
香水y =2536.5 x+197.83
r =0.9997 标准液y =131075 x+2065.4
r =0.998
/
广州所 标准液y =23.675 x+0.1288
r =0.9997
洗发露y =24.429 x+0.7071
r =0.99993
凝胶y =24.220 x+1.0052
r =0.9995
膏霜y =26.246 x-0.3758
r =0.9998
发胶y =52.125 x+2.4966
r =0.9995
香水y =55.806 x+1.0100
r =0.9996 标准液y =225.35 x-0.9534
r =0.9998
标准液
y =240.77 x+2.2151
r =0.9994
表4验证结果显示,甲醇在0.02~4.0g/L浓度范围内呈线性(相关系数>0.998),线性关系良好。
2.2.3 检出浓度和定量浓度
表5 三家验证单位检出浓度和定量浓度
验证单位 验证内容 气-液平衡法
分流比20:1,取样1.0g 直接法
分流比50:1,取样2.0g 蒸馏法
分流比50:1,取样10.0g
大连所
方法检出浓度(mg/kg) 20 25 50
方法定量浓度(mg/kg) 80 100 200
广东所
方法检出浓度(mg/kg) 20 25 25
方法定量浓度(mg/kg) 61 76 76
广州所
方法检出浓度(mg/kg) 洗发露 17
凝胶 21
膏霜 20 洗发露 14
凝胶 12
膏霜 13 24
方法定量浓度(mg/kg) 洗发露 56
凝胶 69
膏霜 67 洗发露 48
凝胶 41
膏霜 42 78
表5验证结果表明,三家验证单位的检出浓度和定量浓度满足本方法的检出浓度和定量浓度要求。
2.2.4 回收率
表6 三家验证单位回收率
验证单位 气-液平衡法回收率(%)
分流比20:1,取样1.0g 直接法回收率(%)
分流比50:1,取样2.0g 蒸馏法回收率(%)
分流比50:1,取样10.0g 范围(%)
大连所 洗发露 96.4~103.0
凝胶 98.1~100.4
膏霜 101.9~103.5
发胶 98.9~99.1
香水 87.5~93.4 洗发露 104.3~105.0
凝胶 101.0~101.0
膏霜 98.3~99.6
发胶 97.0~99.2
香水 92.8~101.4 洗发露 98.3~106.1 87.5~106.1
广东所 洗发露 100.4~108.0
凝胶 106.2~110.2
膏霜 98.5~98.7
发胶 102.1~111.4
香水 107.1~110.3 洗发露 93.2~99.2
香水 92.7~99.5
/ 93.2~111.4
广州所 洗发露 108.1~109.5
凝胶 105.1~107.5
膏霜 96.2~104.7
发胶 105.6~110.5
香水 103.3~105.0 洗发露 88.7~94.0
凝胶 90.4~98.4
膏霜 93.1~99.7
发胶 107.2~112.6
香水 103.1~106.0 / 88.7~112.6
表6验证结果表明,两个浓度水平的回收率均在87.5~113.0%之间,符合要求。
2.2.5 精密度和稳定性
表7 三家验证单位精密度和稳定性RSD结果
验证单位 验证内容 气-液平衡法
分流比20:1,取样1.0g 直接法
分流比50:1,取样2.0g 范围
(%)
大连所 日内精密度RSD(%) 1.5~3.0 0.8~3.7 0.8~3.7
日间精密度RSD(%) 2.8~3.0 1.1~2.7
日内稳定性RSD(%) / 1.4~2.8 1.4~2.8
日间稳定性RSD(%) / 2.5~2.5
广东所 日内精密度RSD(%) 1.65~2.69 0.55~1.23 0.6~3.6
日间精密度RSD(%) 1.55~3.50 3.35~3.51
日内稳定性RSD(%) 2.00~3.91 2.19~3.49 2.0~4.5
日间稳定性RSD(%) 2.10~4.41 2.75~3.76
广州所 日内精密度RSD(%) 1.4~2.3 1.4~1.8 1.4~5.0
日间精密度RSD(%) 2.7~4.4 5.0~5.0
日内稳定性RSD(%) 4.9~4.9 3.1~4.7 2.0~4.9
日间稳定性RSD(%) 2.0~3.7 2.6~4.7
表7验证结果表明,精密度和稳定性RSD均小于5%或等于5%,符合要求。
2.2.6 样品的测定
表8 四家单位实验室样品检测
序号
类别 辽宁所 大连所 广东所 广州所
气-液平衡法
mg/kg 直接法
mg/kg 气-液平衡法
mg/kg 直接法
mg/kg 气-液平衡法
mg/kg 直接法
mg/kg 气-液平衡法
mg/kg 直接法
mg/kg
1# 洗发露 <20 <25 <20 <25 <20 <25 <20 <25
2# 洗发露 <20 <25 28 25 <20 <25 <20 <25
3# 凝胶 <20 <25 <20 <25 <20 <25 <20 <25
4# 凝胶 <20 <25 <20 <25 <20 <25 <20 <25
5# 膏霜 <20 <25 <20 <25 <20 <25 <20 <25
6# 膏霜 <20 <25 <20 <25 <20 <25 <20 <25
7# 发胶 103 120 243 211 112 101 101 97
8# 发胶 <20 <25 <20 <25 <20 <25 <20 <2
9# 发胶 6.6×105 6.8×105 6.0×105 6.6×105 6.1×105 6.1×105 6.3×105 6.8×105
10# 花露水 67 74 133 130 79 64 121 127
11# 香水 20 25 71 50 <20 <25 105 96
12# 香水 <20 <25 464 440 <20 <25 <70 <50
表8四家单位12批次样品(6类,洗发露、凝胶、膏霜、香水、花露水、发胶),结果基本一致,方法满足要求。
2.3 验证结论
综上,实验室内部验证结果和三家单位比对验证结果表明: 所建立的化妆品中甲醇的检测
气相色谱法,满足方法技术要求,方法可靠、可行。