3 结果及讨论
线性关系的考察
分别吸取花椒油素标准溶液,注入高效
液相色谱仪中,按上述色谱条件测定,记录峰面积和进样浓度,以进样浓度(X)为横坐标,峰面积(Y)为纵坐标,绘制标准曲线,强制过原点,得回归方程:Y =7.02×107 X,r =0.999 9。结果表明,花椒油素在进样量浓度在0.002~0.050mg/mL呈良好线性关系。
重复性及精密度试验精确称取同一样品10份,按上述方法制备,进行10次平行测定,计算花椒油素的含量及RSD。结果RSD 为0.136% (n =10)。说明本法重复性及精密度较好。加标回收试验在日常生活中,辣椒制品中很少添加花椒作为辣源,通过测定辣椒酱及剁辣椒,发现其含量为零。因此需要在剁辣椒和辣椒酱中通过添加花椒粉末来测定其花椒油素的含量,以便测定花椒油素的回收率。2.6.1新鲜剁辣椒及辣椒酱的回收率准确称取剁辣椒及辣椒酱10g各6份(其中3份做平行),各加入0.2mg/mL花椒油素储备液2,10,15mL(即0.4,2,3mg花椒油素);按(上 样品的制备)方法制备,HPLC分析,进样量均为10μL,得花椒油素含量及平均回收率见表1。由表1 可知,用此方法测定花椒油素时,回收率为94.4%~99.3%。
添加花椒粉末后测得剁辣椒及辣椒酱中花椒油素含量及回收率称取10g共6份(其中3 份做平行),按(上 样品的制备)方法制备,HPLC分析,进样量均为10μL,计算花椒油素含量,取其平均值,得剁辣椒和辣椒酱中花椒油素含量分别为433.5,389.4mg/kg。各准确加入0.2mg/mL花椒油素储备液2,10,15mL(即0.4,2,3mg花椒油素)。按(上 样品的制备)方法制备,3份做平行,HPLC 分析,进样量均为10μL,计算花椒油素含量及回收率,结果见表2
在提取次数为两次,提取时间分别为3.0,0.5h,甲醇量分别为70,20mL的条件下,剁辣椒中花椒油素的提取效果最好。本试验研究出的反-高效液相色谱法测定花椒油素在含辣制品中含量的方法操作简便,准确度及精密度高,适于对剁辣椒、辣椒酱及其它含有花椒油素的辣椒制品中花椒油素的含量检测,其可作为国家标准的参考方法。