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主题：【第十届原创】聚山梨酯 80 含量检测专用色谱柱饱和试验研究

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发表于：2017/08/24 13:43:07 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
维权声明：本文为wodedipan原创作品，本作者与仪器信息网是该作品合法使用者，该作品暂不对外授权转载。其他任何网站、组织、单位或个人等将该作品在本站以外的任何媒体任何形式出现均属侵权违法行为，我们将追究法律责任。


聚山梨酯 80  含量检测色谱柱饱和试验研究

实验目的：本企业生产控制检验中，采用蒸发光检测器对中药注射液中聚山梨酯  80进行含量检测，存在面积重复性不好的问题，对照品5μl需进样10针，

后连续5针的峰面积RSD值远远比前五针RSD值小，通过咨询专家和供应商得知辞色谱柱存在预饱和的过程，本实验的目的在于找到改色谱柱预饱和的浓度点，

通过加大进样浓度或加快进样次数后快速使色谱柱快速达到稳定的状态，保持良好系统适用性缩短饱检测周期的目的。

1、仪器与试剂
1.1、仪器高效液相色谱仪 （ Agilent1260）蒸发光检测器（385-ELSD）
电子天平（TLE-204（CAB-003）梅特勒）MILLI-Q超纯水处理系统
1.2、试剂

乙酸铵为色谱级（Fluka）乙腈为色谱级（Merck）

1.3、样品与对照品

聚山梨酯80 （供注射用）南京威尔化工有限公司
2、不同厂家色谱柱饱和问题所得结果


3、色谱柱饱和量的摸索

色谱条件为：溶剂水--柱温25℃-进样速度200μl/min-启用洗针。（其他条件：乙腈0.02mol/L乙酸胺（12-88）-流速0.6ml/min--雾化器55℃--蒸发器55℃-氮气速度1.8L/min）。

3.1 、进样量15μl连续进样五次系统适用性试验研究实验图谱


 

峰面积RSD值如下：

进样次数

峰面积

RSD%

样品浓度mg/ml

进样体积

μl

饱和进样量

μg

1

2746.29932

（1-5针）22.67%

（2-5针）1.30%

1.255

15

18.825

2

5022.87598

3

5027.98682

4

5127.14677

5

5149.75000


3.2 、进样量5μl连续进样10次系统适用性试验研究实验图谱




5μl进样10次系统适用性试验数据如下：

进样次数

峰面积

峰面积RSD%

浓度

（mg/ml）

进样总量

1

369.89517

（1-5针）27.53%

（6-10）针1.50%

1.251

31.275

2

712.75726

3

772.31641

4

815.69965

5

850.46533

6

808.73938

7

797.76263

8

812.64270

9

790.17358

10

784.27612

4、结论：



15μl系统适用性实验进样1针后色谱柱达到饱和，峰面积RSD%＜2%，通过计算其饱和量为18.825μg；
5μl系统适用性实验进样5针后色谱柱达到饱和，峰面积RSD%＜2%，通过计算其饱和量为31.275μg。
调整进样浓度，使1针进够色谱柱饱和量，考察色谱柱能否饱和。

5、挑战性试验：

5.1、一次性进样饱和量18.825μg，5μl进样4次系统适用性试验数据如下：





序号

峰面积

RSD%

样品

浓度mg/ml

进样体积

μl

进样量

μg

1

4132.62305

（2-5针）13.92%

1.910

10

19.100

2

575.87415

1.261

5

6.305

3

759.61072

4

792.74103

5

776.37408


5.2、进一针饱和量31.275μg，后连续进样3次实验图谱数据如下：


序号

峰面积

RSD%

样品浓度mg/ml

进样体积

μl

饱和进样量

μg

1

7566.20166

（2-4针）13.92%

3.130

10

31.30

2

361.97903

1.261

5

6.305

3

571.55499

4

648.78149

结论：先进一针饱和量18.825μg，后进5μl4针，结果色谱柱未达到饱和。

先进一针饱和量31.30μg，后进5μl4针，结果色谱柱未达到饱和。考虑仪器进样速度

和用溶剂水洗针可能会影响峰面积重复性差。降低进样速度和取消洗针程序对色谱柱

饱和问题考察研究。

该帖子作者被版主 小不董加 10积分， 2经验，加分理由：支持原创
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上党之巅
wodedipan
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2017/8/24 13:44:41 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
试验未完待续，希望各位老师多提指导性建议。
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Flynnchen
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2017/8/28 7:29:59 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
分析的不错
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zyl3367898
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2017/9/4 22:14:59 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
有什么简单办法，进两针就能让它饱和？
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小不董
doxw0323
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2017/9/5 7:55:23 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
土温80曾经也想测试，很多检测器没响应，分离不好，也就放弃了。
楼主最低能测定到多少浓度？
用过示差检测器吗？是否可行？
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上党之巅
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2017/9/7 11:30:30 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 小不董(doxw0323) 发表:
土温80曾经也想测试，很多检测器没响应，分离不好，也就放弃了。
楼主最低能测定到多少浓度？
用过示差检测器吗？是否可行？
RID的测定结果不如ELSD
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Insm_7fb5ae7a
Insm_7fb5ae7a
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2021/4/14 11:20:57 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
有气相方法吗
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上党之巅
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2021/4/16 21:29:46 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 Insm_7fb5ae7a(Insm_7fb5ae7a) 发表:
有气相方法吗
目前为止这是最好的方法
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