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液相色谱（LC）
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主题：【求助】高效液相色谱样品与标准品浓度

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发表于：2018/05/14 10:52:53 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
大家好，我在用高效液相色谱法测定芒果苷含量，样品：0.2g加甲醇溶解，超声提取，旋蒸，过滤，最后是定容到25ML。所以样品浓度是：8mg/ml。
请问标准品我应该配置多少浓度的？
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2018/5/14 11:50:14 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
样品含量范围是多少？
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2018/5/14 15:10:07 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
你的0.2g是指的样品吧！最后测得的浓度应该是芒果苷的浓度，而不是样品的浓度吧！你可以先查一下你测得那种样品中芒果苷的含量大约是百分之多少，大概算一下，如果是单点的话，你就配一个相似浓度的就行，如果是标曲，就配一个检出限，一个定量限，其余的就可以自己发挥了，只要确保样品中芒果苷的含量在你的标曲范围内就行了。
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夏天的雪
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2018/5/14 16:32:27 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
同楼上，你配制一个标准曲线，8mg/mL在你浓度范围内，最好在中间值，例如你可以配制1~10mg/mL，或者1~20或50mg/mL，这个结果不是你的最终结果，还需要依据样品的重量进行计算
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2018/5/14 17:16:35 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 p3140921(p3140921) 发表:
你的0.2g是指的样品吧！最后测得的浓度应该是芒果苷的浓度，而不是样品的浓度吧！你可以先查一下你测得那种样品中芒果苷的含量大约是百分之多少，大概算一下，如果是单点的话，你就配一个相似浓度的就行，如果是标曲，就配一个检出限，一个定量限，其余的就可以自己发挥了，只要确保样品中芒果苷的含量在你的标曲范围内就行了。
谢谢你的回复，0.2是原样品，我查的是1g样品中含芒果苷约2.35%，所以0.2g中含量是4.7mg，我是定容到25ML（要考虑稀释倍数吧），所以芒果苷浓度是4.7mg/25ML=0.188mg/ML。那么我配置芒果苷标准品浓度：20mg定容到100ML，也就是0.2mg/ML，标准曲线我就配置0-0.2mg/ML。这样做是对的吗？求解，感谢！
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2018/5/14 17:17:58 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 支点(zhx_fs_ln) 发表:
样品含量范围是多少？
0.2是原样品，我查的是1g样品中含芒果苷约2.35%，所以0.2g中含量是4.7mg，我是定容到25ML（要考虑稀释倍数吧），所以芒果苷浓度是4.7mg/25ML=0.188mg/ML。那么我配置芒果苷标准品浓度：20mg定容到100ML，也就是0.2mg/ML，标准曲线我就配置0-0.2mg/ML。这样做是对的吗？
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支点
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2018/5/14 18:04:50 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 17071608(Ins_db35a5e7) 发表:
0.2是原样品，我查的是1g样品中含芒果苷约2.35%，所以0.2g中含量是4.7mg，我是定容到25ML（要考虑稀释倍数吧），所以芒果苷浓度是4.7mg/25ML=0.188mg/ML。那么我配置芒果苷标准品浓度：20mg定容到100ML，也就是0.2mg/ML，标准曲线我就配置0-0.2mg/ML。这样做是对的吗？
最大点加到0.4mg/mL吧
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hnteng
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2018/5/16 21:16:45 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
  这个浓度估计高得不行了。

  一般我们用紫外检测器。常规地，我一般是配30-50ug/ml的样子先去试。让色谱峰的峰高不超过200mv。基本上作为标曲的上限。下限可低到10-20mv的样子。
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2018/5/16 22:43:14 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
芒果苷是某药的成分，药典应该有标准品浓度的要求吧
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moviehua
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2018/5/21 11:26:31 9楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
使样品溶度在标曲的中间范围即可
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夏天的雪
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2018/5/22 10:09:41 10楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 17071608(Ins_db35a5e7) 发表:
0.2是原样品，我查的是1g样品中含芒果苷约2.35%，所以0.2g中含量是4.7mg，我是定容到25ML（要考虑稀释倍数吧），所以芒果苷浓度是4.7mg/25ML=0.188mg/ML。那么我配置芒果苷标准品浓度：20mg定容到100ML，也就是0.2mg/ML，标准曲线我就配置0-0.2mg/ML。这样做是对的吗？
先进一针看一下0.2mg/mL的标准溶液的峰高有多大，如果响应值很大，可以考虑进一步稀释样品，如果响应值不大，标准曲线的浓度可以做到0.3或0.4mg/mL
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