实战宝典 原创大赛 仪器问答 仪友会 总帖：8035575今日发帖：7 我的社区 签到
快速导航 采购仪器 提醒
液相色谱（LC）
版主:
入住本版
专家:
居民列表

主题：【求助】waters测有机酸，柠檬酸和琥珀酸出峰时间一样

浏览0 回复10 电梯直达
陈少灿
头像
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
发表于：2018/10/11 14:52:43 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
问题：用waters测有机酸时，柠檬酸和琥珀酸的出峰时间接近，峰型分不开。
描述：流动相为95% 5mM H2SO4 + 5% 甲醇，流速0.4ml/min。测定五种有机酸（草酸，苹果酸，柠檬酸，琥珀酸和富马酸）。样品和标品均用超纯水溶解。之前一直用这个体系，混标能出现5个分离的峰，可是现在变成四个了，发现是柠檬酸和琥珀酸混一起了。
这个问题该怎么解决？
所有药品和流动相均重新配制也还是不能分离开柠檬酸和琥珀酸。
柱子是伊力特Hypersil BDS C18, 4.0×150mm
下图是第一次做，分离得很好的
这是五个峰都分离好的
之后即使把流速换成0.2ml/min，也没分离开
没分离开
该帖子作者被版主 夏天的雪加 2积分， 2经验，加分理由：鼓励发帖
为您推荐
近期热榜
热门活动
您可能想找: 液相色谱(LC) 询底价
选参数 看心得 找厂商 查方案
专属顾问快速对接
立即提交
相关阅读
夏天的雪
bingwang228
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
2018/10/11 15:13:25 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
用长柱，这两个应该可以分开的，还有调ph值
赞贴
1
收藏
0
拍砖
0
举报
陈少灿
v3220400
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
2018/10/11 15:35:39 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 夏天的雪(bingwang228) 发表:
用长柱，这两个应该可以分开的，还有调ph值
谢谢回复。我换了安捷伦的长柱，然后单测柠檬酸和琥珀酸的出峰时间，也还是一样。调pH值的话，具体步骤呢？比如我现在是5mM H2SO4，给它换成20mM H2SO4可以吗？
赞贴
0
收藏
0
拍砖
1
举报
小平
zhaojunping117
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
2018/10/11 15:36:50 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
老师，您好，从图上来判断应该是因为柱效下降导致的。有两个建议，一建议您换柱子，二建议您换流动相，流动相用的是强酸，pH值太低，已经超过了仪器和柱子的耐受范围，很容易导致柱效下降，用不了多长时间柱子就会坏。
赞贴
1
收藏
0
拍砖
0
举报
初心
m3170710
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
2018/10/11 15:41:19 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
是柱子的问题，换新柱做吧，你的流动相体系酸度大，伤柱子
赞贴
0
收藏
0
拍砖
0
举报
weiqing
weiqing1983
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
2018/10/11 15:42:29 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
如果换了色谱柱还是效果不好的话，可以换长柱或者串联两根柱子试一下。
赞贴
0
收藏
0
拍砖
0
举报
检测老菜鸟
v3295053
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
2018/10/13 6:47:10 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
如果单标都走在一起的话，我建议先考虑标准品的问题，我们遇到过一次，发错标准品了，出峰位置重叠。因为你的流速已经够慢了
赞贴
0
收藏
0
拍砖
0
举报
sdlzkw007
sdlzkw007
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
2018/10/13 8:25:22 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
建议更换色谱柱和流动相
赞贴
0
收藏
0
拍砖
0
举报
moviehua
moviehua
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
2018/10/15 9:23:40 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
调节Ph值，先3-7-10， 然后再细化摸索。
赞贴
0
收藏
0
拍砖
0
举报
陈少灿
v3220400
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
2018/10/23 9:58:23 9楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
感谢大家的回复。在柱子耐受范围内，我试验了10-8-4-2mM的H2SO4，这四个浓度只有2mM能明显分开，谢谢大家
赞贴
0
收藏
0
拍砖
0
举报
夏天的雪
bingwang228
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
2018/10/23 17:22:30 10楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 陈少灿(v3220400) 发表:
感谢大家的回复。在柱子耐受范围内，我试验了10-8-4-2mM的H2SO4，这四个浓度只有2mM能明显分开，谢谢大家
能分开就好，可以尝试不用硫酸，用磷酸盐缓冲溶液，pH值在2.5到3之间
赞贴
0
收藏
0
拍砖
0
举报
猜你喜欢 最新推荐 热门推荐
头像
高级回复 发表评论
品牌合作伙伴
岛津
日立科学仪器
珀金埃尔默仪器（上海）有限公司（PerkinElmer）
日本电子株式会社
丹纳赫
安捷伦
赛默飞世尔科技
普析通用
欧波同
天美
天瑞仪器
德国耶拿
海能技术
马尔文帕纳科
磐诺科技
上海仪电科仪
梅特勒托利多
聚光科技
莱伯泰科
盛瀚
多宁生物
丹东百特
科哲
卓立汉光
屹尧科技
华谱科仪
宝德仪器
优莱博
HORIBA
布鲁克核磁