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液相色谱（LC）
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主题：【已应助】脱氢乙酸前处理中调节pH的作用？

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轻风伴月
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发表于：2020/04/27 10:34:22 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
按照GB 5009.121脱氢乙酸前处理流程，有的基质样品，如糕点类，在加入沉淀剂硫酸锌之后，需要将pH调节至7.5，之前一直以为调节p H的作用只是等电点沉淀蛋白质，以前也做过不调pH的对比，结果相差不大，似乎可以证明此结论。但是前几天测安赛蜜，基质为牛肉制品，调节pH之后测不到值，不调节pH可以测出值（国标未不调节pH），因此有点疑惑，调节pH除了等电点沉淀蛋白以外，还有其他作用么？比如保持安赛蜜的稳定性？
推荐答案：hujiangtao回复于2020/04/27
我觉得脱氢乙酸调pH7.5不是为了沉淀蛋白，一般蛋白变性需要强酸或强碱条件，7.5应该不能让蛋白变性，目的是为了让脱氢乙酸大部分保持分子状态容易在色谱柱上保留。安赛蜜结构中有NH容易形成离子，调完pH值可能大部分安赛蜜成离子状态了不易在色谱柱上保留。
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hujiangtao
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2020/4/27 10:51:24 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
我觉得脱氢乙酸调pH7.5不是为了沉淀蛋白，一般蛋白变性需要强酸或强碱条件，7.5应该不能让蛋白变性，目的是为了让脱氢乙酸大部分保持分子状态容易在色谱柱上保留。安赛蜜结构中有NH容易形成离子，调完pH值可能大部分安赛蜜成离子状态了不易在色谱柱上保留。
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sdlzkw007
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2020/4/27 12:42:12 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
在前处理过程中的PH控制有几个考虑1）通过改变酸碱可以使目标物转换形态而与基质分离。比如离子交换模式SPE通常就是酸性上样，碱性洗脱（阳离子交换）或者反过来（阴离子交换）。2）通过改变PH可以细化不同目标物的洗脱时间，达到分离的目的。液相色谱法中流动相调节PH就是如此。3）通过改变PH可以提高部分目标物的提取效率，也就是改变目标物的相转移能力。比如乙腈加乙酸的多农残提取法就是这样的。
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一片枫叶
v2960432
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2020/4/30 19:14:21 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
楼主问题解决了没？
根据回帖找出最佳答案，以便于尽快结贴！
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