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主题：【已应助】用缓冲盐做流动相的时候，梯度如何设置？

浏览0 回复6 电梯直达
提莫酱爆小蘑菇
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发表于：2020/08/19 10:39:21 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
如题：

最近做一个胺类盐酸盐，里面有个杂质是盐酸二甲双胍，我用了0.005mol/l的磷酸二氢钾，PH=3.0的水相和乙腈作为流动相，

设置梯度运行，但是梯度已经设置的很缓了，基线还是不平稳……

之前也有设置过类似的梯度，唯一不同的就是水相里面盐浓度高一些，还加了5%的乙腈……梯度也是平缓的。

以下梯度和基线图：

梯度：0      4      14      20    20.01    30

          5%  5%  65%  65%    5%        stop

之前设置的比这斜率大多了，都没什么问题，此次不知道哪里出了问题，左边峰高大约是50mv

推荐答案：有水有渝回复于2020/08/20
首先盐浓度不高，你上面走的是空针梯度、空白梯度还是样品，先检查所用的试剂是不是没有问题，梯度设置是不是如你所说的。
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2020/8/20 9:44:38 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
磷酸盐-有机相，平衡本身会需要一段时间，楼主还是梯度洗脱，是否考虑等度洗脱能达到目的？
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有水有渝
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2020/8/20 10:42:34 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
首先盐浓度不高，你上面走的是空针梯度、空白梯度还是样品，先检查所用的试剂是不是没有问题，梯度设置是不是如你所说的。
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提莫酱爆小蘑菇
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2020/8/20 16:05:08 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 言逊(Insm_220b9c52) 发表:
磷酸盐-有机相，平衡本身会需要一段时间，楼主还是梯度洗脱，是否考虑等度洗脱能达到目的？
梯度洗脱，因为产物出峰早，但是可能还有别的杂质，如果等度的话，要么产物出峰很早，要么杂质不出峰
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提莫酱爆小蘑菇
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2020/8/20 16:05:38 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 有水有渝(xky0230699) 发表:
首先盐浓度不高，你上面走的是空针梯度、空白梯度还是样品，先检查所用的试剂是不是没有问题，梯度设置是不是如你所说的。
没问题，走的是空白梯度，梯度设置确实如我所说
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有水有渝
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2020/8/22 11:03:42 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 提莫酱爆小蘑菇(m3116636) 发表:
没问题，走的是空白梯度，梯度设置确实如我所说
走空针看看，就是不进样或进0ul然后运行梯度采集基线情况
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言逊
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2020/8/31 11:14:42 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 提莫酱爆小蘑菇(m3116636) 发表:
梯度洗脱，因为产物出峰早，但是可能还有别的杂质，如果等度的话，要么产物出峰很早，要么杂质不出峰
多走几针空白，看看趋势是不是一样
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