各位老师好:我在做一个混合样的分离,用的是waters的紫外
液相色谱,利用三段的梯度洗脱进行分离,每一个梯度的变化都很大,是阶梯状的洗脱。现在我在做定量分析,打算利用一个内标物进行内标(因为我走的时间较长,如果每次都打外标不现实)。积分这块遇上了麻烦:我的内标物是在第一个基线出的,三段梯度上都有我要的物质,我该如何积分?我这种肯定是需要手动积分,每段上我都需要重新设置阈值与峰宽进行积分,也就是我会有三个积分方法,那么问题就来了,我的内标物需要用哪种方法积分,是利用第一段的方法积出来内标物的面积,然后每段上的物质进行比对,还是利用每段上的方法重新积一个对应的内标峰进行比对。还有一个问题是,我每次进样,方法需要重新设置吗?
我的谱图基本如图,内标物出峰在10min(图中未显示)。请教各位老师,如何才能减小误差。