主题:【原创】tmt蛋白质组学原理

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tmt蛋白质组学原理
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?TMT蛋白质组学的原理主要基于串联质谱标签(Tandem Mass Tag, TMT)技术,这是一种用于定量蛋白质组学的化学标记技术。?

TMT技术通过使用一系列的化学标签来标记不同样本中的蛋白质或肽段,然后在质谱分析中进行检测和比较。这种方法允许同时分析多个样本中的蛋白质表达差异,从而用于比较不同条件下的蛋白质表达水平。TMT标签由报告基团、间隔臂和胺反应性基团组成,这些标签在标记期间结合到肽的N末端或赖氨酸残基上。通过这种方式,可以在保证样本间重复稳定性的同时,实现更高检测深度,提供激酶-药靶分析,助力客户进行激酶药靶发现。

在TMT定量分析中,不同的同位素质量标签被用来标记不同的系统条件。标记之后,混合所有样品并在单个液相色谱-质谱(LC-MS)实验中进行分析。由于采用的是同位素标签,不同TMT标记样品的所有肽都会发生共洗脱,进入质谱仪后同时被检测为单个且不可区分的前体离子峰。这种设计可以增强一级质谱信号,有效减少混合样品的复杂性,同时提供多重功能进行相对定量蛋白质组学分析。

在二级质谱(MS2)中,报告基团、间隔臂和反应基团之间的化学键断裂,TMT报告基团和间隔臂被释放。发生平衡组中性丢失后,MS检测并记录报告组,产生于MS2谱低质量区的TMT报告离子峰,其强度反映了肽在不同样品中的相对表达信息。此外,MS2中肽碎片离子峰的质荷比反映了肽的序列信息,通过数据库检索,可以从这些原始数据中获得蛋白质的定性和相对定量信息?
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