主题：【原创】凝胶色谱法的分离原理是

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发表于：2024/10/02 21:38:33 楼主管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

凝胶色谱法的分离原理是

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2024/10/9 15:59:45 沙发管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

凝胶色谱法（Gel Permeation Chromatography, GPC）或称凝胶过滤色谱法（Gel Filtration Chromatography, GFC），是一种基于分子大小差异来分离混合物的技术。它主要利用固定相中的多孔凝胶珠作为分离介质，通过混合物中各组分在凝胶珠孔隙中的滞留情况来进行分离。

### 凝胶色谱法的分离原理：

1. **分子尺寸效应**：
- 大分子无法进入凝胶珠的小孔径内，只能在凝胶珠之间流动，因此流经柱子的时间较短，先被洗脱出来；
- 中等大小的分子可以部分进入凝胶珠的小孔径内，经过一段滞留后再流出；
- 小分子则可以自由进入凝胶珠的所有孔隙，经历最长的路径，所以最后被洗脱出来。

2. **固定相的选择**：
- 固定相通常是多孔的凝胶珠，如交联的葡聚糖（Sephadex）、聚丙烯酰胺（Bio-Gel P）、聚苯乙烯-二乙烯基苯共聚物（如Porapak U）等。选择合适的固定相对于分离效果至关重要。

3. **流动相的选择**：
- 流动相通常是适合待分析物质溶解的溶剂。对于有机聚合物，常用有机溶剂如四氢呋喃（THF）；而对于蛋白质或多肽，则常用缓冲溶液。

4. **洗脱顺序**：
- 由于大分子最先流出，小分子最后流出，因此凝胶色谱法也被称为分子排阻色谱法（Size Exclusion Chromatography, SEC）。这种按分子大小顺序洗脱的特点使得凝胶色谱法特别适用于分子量分布（MWD）的测定。

5. **应用范围**：
- 凝胶色谱法广泛应用于聚合物的分子量及其分布分析、蛋白质和其他生物大分子的纯化与鉴定等领域。

通过上述原理，凝胶色谱法可以有效地将混合物中的组分按照分子大小的不同进行分离，从而实现对样品成分的分析或纯化。

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