主题：【转帖】生姜中涕灭威及其代谢产物的HPLC 快速检测法

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发表于：2011/02/15 15:48:09 楼主管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

摘要：建立了涕灭威、涕灭威亚砜和涕灭威砜在生姜中残留量的高效液相色谱快速检
测方法。样品用乙腈提取，加入PSA 粉去除脂类物质，加入C18 粉去除色素和维生素。采
用甲醇、水和乙腈进行梯度洗脱。结果表明：该方法在在0.05～5.0mg/L 范围内，涕灭威、
涕灭威亚砜和涕灭威砜峰面积与其浓度呈现良好的线性关系; 在0.01,0.025 和
0.050mg/kg3 个添加水平下,3 种农药回收率为78.33～101.33%,相对标准偏差为4.08～
11.46%.该方法灵敏度高,涕灭威、涕灭威砜和涕灭威亚砜的最低检出限分别为0.005、0.01
和0.01 mg/kg。
关键词：涕灭威；涕灭威亚砜；涕灭威砜；生姜；高效液相色谱；残留
涕灭威是近年来使用较多的一种氨基甲酸酯类农药，主要用于生姜种植过程中螨虫、
线虫的防治。纯品为白色结晶，略带硫磺气味，高毒。该药在植物体内先被氧化成涕灭威
亚砜，而后被氧化成涕灭威砜，进而水解为无毒物质[1]。涕灭威亚砜和涕灭威砜具有很高
的毒性。日本肯定列表对两者在生姜中的限定值均为0.01mg/kg。从1977 年Moye 等第一
次采用HPLC 柱后衍生测定氨基甲酸酯类农药以来，这种检测方法的使用越来越普遍[2]。目
前，关于生姜中涕灭威及其代谢产物的残留分析方法国内尚未见公开报道。本文采用高效
液相色谱法，研究建立了生姜中涕灭威及其代谢产物残留检测方法。该方法用乙腈进行提
取，加入C18 粉和PSA 粉去除生姜中的干扰物质。方法简便、快捷。对于掌握涕灭威及其
代谢产物在生姜中的残留状况，具有一定的指导意义。
1.实验部分
1.1 仪器和试剂
SHIMADZU LC-20A 高效液相色谱仪（配有荧光检测器和柱后衍生系统）；IKA-T25 高速
匀浆机；METTLER TOLEDO PL203 电子天平；EYELA(日本)半自动旋转蒸发仪；EYELA(日本)
振荡器；高速离心机（上海安亭）；超纯水器（密理博）。
乙腈（色谱纯，TEDIA）;甲醇（色谱纯，TEDIA）；C18 粉（SUPELCO）;PSA 粉（SUPELCO）；
NaCL（优级纯）；无水硫酸钠（优级纯）；NaOH（优级纯）；四硼酸钠（基准物质）；邻苯二
甲醛（OPA）；涕灭威、涕灭威亚砜、涕灭威砜标准品（农业部环境保护科研监测所监制）。
1.2 衍生试剂的配置
1.2.1 称取1gNaOH,加入500ml 超纯水定容，过0.2um 膜待用。
1.2.2 称取0.015g 邻苯二甲醛，加入50ml 甲醇使其完全溶解后，加入0.18gNaOH 和3.34g
硼酸，用500ml 超纯水定容后，过0.2um 膜，加入50ulβ－巯基丙
1.3 色谱条件
色谱柱:FC-ODS 柱（4.6mm×75mm）；流动相:甲醇、水和乙腈，采用梯度洗脱（见表1）；
流速：0.5ml/min；柱温箱温度：50℃；荧光检测器：激发波长（340nm），发射波长（445nm）；
柱后衍生系统流速：0.5ml/min；进样量：2ul。
3
1.4 样品前处理
1.4.1 样品的提取
准确称取生姜样品20.00g，置于80ml 离心管中，加入40ml 乙腈，匀浆1 分钟后，加
入5gNaCL，再次匀浆1 分钟，离心5 分钟后吸取上清液10ml，40℃低温旋蒸近干，残留用
4ml 乙腈溶解待用。
1.4.2 样品的净化
5ml 离心管中依次加入150mgC18 粉，150mgPSA 粉和200mg 无水硫酸钠。将1.4.1 所得
溶液转移到上述离心管中，漩涡振荡2 分钟后离心。吸取上清液2ml 于250ml 鸡心瓶中，
40℃旋蒸近干，氮气吹干后，用乙腈定容至2ml，过0.45um 膜上机待测。
2.结果与讨论
2.1 方法的线性关系及检出限
配置涕灭威、涕灭威砜和涕灭威亚砜0.05、0.2、0.5、2.0、5.0mg/L 的5 个不同质量
浓度的标准溶液，按照上述色谱条件，测定相应的响应值，并以质量浓度为横坐标，响应
值为纵坐标作图，得出涕灭威、涕灭威砜和涕灭威亚砜的线性相关曲线（见表2）。
表2 线性方程和相关系数
Tab.2 Regression equations and correlation coefficients
组分回归方程相关系数
涕灭威 206.43x+4.291 0.9997
涕灭威砜 197.76x+5.588 0.9998
涕灭威亚砜 196.68x+1.9689 0.9999
2.2 方法的回收率和精密度
为评价方法的有效性,选用阴性生姜样品为测试对象, 分别添加不同含量水平的的3
种农药标准品，漩涡混匀5 分钟，静置60 分钟，使得添加浓度分别为0.01、0.025 和
0.05mg/kg。每个添加水平按照上述液相条件平行测定6 次，计算回收率和相对标准偏差
（RSD）.结果见表3。涕灭威、涕灭威亚砜和涕灭威砜标准色谱图、生姜空白色谱图和添
加色谱图分别见图1。
表1 梯度洗脱程序
Tab.1 The gradient elution program
Time/（min）流（ml/min）水（％）甲醇（％）
4.00 0.5 86 14
10.00 0.5 60 40
17.00 0.5 55 45
23.00 0.5 40 60
24.00 0.5 40 60
24.01 0.5 86 14
36.00 0.5 86 14
4
表3 回收率试验(n=6)
Tab.3 Recoveries of Aldicarb ,Aldicarb Sulfone and Aldicarb Sulfoxide
组分添加量/(mg．kg-1) 平均回收率/% RSD/%
0.01 97.33 5.14
0.025 89.00 8.26
涕灭威
0.05 79.67 6.23
0.01 101.33 4.08
0.025 97.00 11.42
涕灭威砜
0.05 98.67 9.48
0.01 97.67 8.13
0.025 95.83 10.51
涕灭威亚砜
0.05 78.33 11.46
图
1 液相色谱图a 标准样品(0.05mg/L);b 空白样品;(c)加标样品(加标量为0.01mg/kg）
1-涕灭威砜;2-涕灭威亚砜;3-涕灭威
Fig.1 Liquid chromatogram of standarda and samples
0.0 5.0 10.0 15.0 20.0 25.0 30.0 min
0
1
2
3
4
5
mV
Detector A:Ex:340nm,Em:445nm
1
2
3
0.0 5.0 10.0 15.0 20.0 25.0 30.0 min
-2.0
-1.5
-1.0
-0.5
0.0
0.5
1.0
1.5
2.0
mV
Detector A:Ex:340nm,Em:445nm
a
b
0.0 5.0 10.0 15.0 20.0 25.0 30.0 min
-1.5
-1.0
-0.5
0.0
0.5
1.0
1.5
2.0
mV
Detector A:Ex:340nm,Em:445nm
c
1
2 3
5
3.结论
本方法对生姜中的涕灭威、涕灭威砜以及涕灭威亚砜同时进行了定量分析，研究结果
表明，前处理方法快速、简单、试剂用量少、净化效果好。该方法的回收率稳定、线性关
系良好、检出限低完全满足我国进出口蔬菜中氨基甲酸酯类农药的检测要求。
[参考文献]
[1] 唐纲岭，张威，朱永平，等.烟草中涕灭威残留量的测定[J].烟草科技/烟草化学，
2005，1：21－23.
[2] 武中平，高巍，杨红.氨基甲酸酯类农药残留测定方法的研究进展[J].江苏化工，
2004，32（5）：24－27.
[3] 段文仲，郝东生.高效液相色谱法同时测定水果中多种农药残留量的方法研究[J].
农药，1998，37（8）：20－22.
[4] 陈燕清，颜流水.HPLC-MS/MS 法快速测定果蔬中的杀线威和涕灭威残留[J].南昌
大学学报，2006，30（6）：574－577.
[5] 涕灭威在土壤中残留与移动行为的动态模拟[J].环境污染与防治，1994，16（6）：
1-5.
[6] 蒋新明，蔡道基，华晓梅.高效液相色谱柱后衍生化法用于氨基甲酸酯类农药的测
定[J].1994，12（1）：32－34.

附件：

生姜中涕灭威及其代谢产物的HPLC 快速检测法.pdf