课本上说,保留时间表示待分离组分通过色谱柱的时间,是从进样开始计时,到检测器信号达到最大值所用时间。但是课本后面又说,信号达到最大值的时候,组分还没有全部通过色谱柱,只流出了一半,还有一半在色谱柱内的固定相和流动相中,这个和前面保留时间的定义矛盾吗?
课本教材一般都是老师傅老教师写的,比较经典,一般错误很少的。教材前面已经说了踏板理论与实际色谱分析一般样品给出的色谱峰都是接近于对称的正态分布的色谱峰,而通常情况下色谱柱与检测器接口之间死体积不会很大(除了特殊阀应用外),因此当你的某组分经过色谱柱分离走到柱子末端,此时组分在色谱柱内依旧是在
气相与固定相两相分布,在色谱柱轴向看某组分的存在状态是呈现轴向立体的云状分布,两端浓度逐渐减小,中间浓度最大,离开色谱柱末端后进入检测器,检测区分给了响应的电信号反映出流出色谱柱末端组分的浓度分布情况,当达到最大浓度时候,检测器也即同时给出了最大色谱峰信号(实际上有死体积,存在一定延迟扩散,要晚一点时间),这一时刻色谱柱还有另一半色谱峰的物质在色谱柱末端里面继续流动分离的。这是动态连续过程。不存在时间与空间的矛盾。
而且为什么保留时间是从进样到峰值呢?为什么不是从进样到峰消失,这样不是表示所有组分都流出来了吗?
通常情况下色谱进样时间较为容易准确测定,以保留时间定义色谱峰峰高最大值时间,比较方便统一,容易测量用于定性。相对于色谱峰的起点与终点的时间,更加稳定变化影响因素少一些。起点与终点时间受到基线噪声与波动,峰形拖尾前伸,积分斜率灵敏度影响很大,稳定性更差,所以选择色谱峰最高点时间作为保留时间。