原文由 歌名(Ins_eedcdc41) 发表:使用什么色谱柱?等度洗脱还是梯度洗脱?流动相pH这么低!,平衡主子的时候压力稳定吗?可以尝试把柱平很时间延长一点。最好不要引入三氟乙酸,这个东西残留会比较严重(这点是我老大某次跟我说,具体没试过)色谱柱用过ODS-A、triart-C18、LP-C18,梯度等度也都试过。我们现在一台仪器上摸索方法,将各峰分离,但是更换至另外的仪器,或者更换流动相,相对保留时间就波动很大,而且还会发生杂质出峰位置颠倒交换的情况。主成分一个含有氨基和羧基,另一个含有肼基和羧基,基本上属于两性化合物,它们的杂质从结构上来看也同样是两性化合物。目前就是方法的重现性很差,不知道从何下手来优化。