主题：【讨论】大家来讨论一下高速逆流色谱技术

以下是HSCCC技术的发展历史（摘抄）:
  运动螺旋管内两液相对流分配的现象，是逆流色谱的物理基础。这一现象是Dr．Ito于1966年在日本大版大学医学院首先发现的，随后，Dr．Ito赴美在美国国家健康研究院(NIH)工作，于1970、1971年两次在"Scince"杂志上发表了对该技术基本模型的研究结果。此后他针对抗生素、肽、氨基酸等特定样品的分离课题，在实验室不断完善相应的试验模型与实验样机，获得了一系列的发明专利，发表了一系列的研究论著，为逆流色谱技术的发展打下了初期的基础。
　　1978年，当时任我国卫生部药品生物制品检定所所长的周海钧教授，从世界卫生组织的资料中获知Dr．Ito在NIH研制逆流色谱技术模型，并已用于抗生素异构体分离。1980年，张天佑的小组研制出我国第一台逆流色谱仪器，并由检定所抗生素室用于抗生素成分的分离与分析检定。张天佑认为，这种不用固态载体的液液分配色谱新技术，更适合于复杂的药用植物成分的分离与纯化，在蔡定国教授等植物药学专家的帮助与合作之下，完成了首批生物碱、黄酮等类中药成分的分离应用研究，其结果发表后引起了国内外的关注。这些工作使我
国在逆流色谱技术及其应用研究方面处于国际的前列。
　　1987-1988年，张天佑教授应美国NIH邀请，赴美国同Dr．Ito合作从事逆流色谱技术及相关生物工程技术的研究，两人共同推进了更为实用 (分离效率更高、分离时间更短) 的高速逆流色谱技术(High-Speed Countercurrent Chromatography，简称HSCCC)的发展，并共同获得美国发明专利 (U. S. Patent NO.5，104,531,Filed：Aug.5，1991)。在美期间，张天佑教授还同我国医学科学院药物研究所方起程教授、华西医科大学药学院肖悼英教授等密切合作，发表了一批用HSCCC分离纯化天然药物活性成分的论文，为形成我国HSCCC技术在天然产物这一应用领域的国际领先优势和技术特色打下了基础。当时，我国驻美大使馆科技处一秘李家瑶同志关注到张天佑的创新研究成果，曾向科技部、北京市科委及张天佑的国内所在单位发专文予以推荐。
　　1990年、1991-1993年，张天佑又两次应邀赴美，在北卡州大学、北卡州三角研究园区研究所、加州湾区生物高科技研究部门从事客座研究，内外结合，保持了我国在HSCCC分离技术领域的国际领先地位，特别是不断发展了我国在天然产物成分分离纯化与制备技术方面的特色与优势。1995年，由国家科技部和中医药管理局组建的国家中药制药工程技术研究中心(上海浦东)决定同张天佑实验室建立现代分离纯化技术联合实验室，使我国HSCCC的研究更紧密地为中药现代化服务。这方面的工作，已作为该国家工程中心"九五"期间的两项重大
技攻关成果之一呈报科技部。北京市科委看到张天佑实验室的研究工作，能构成一个高新技术的平台，能为生物医药及广泛相关产业提供技术支持与服务，于1998年决定在原实验室的基础上建立北京天然产物分离纯化技术研究中心。目前该研究中心已经成为以HSCCC技术为核心的、综合利用二氧化碳超临界萃取、高效液相色谱、凝胶色谱等先进技术的分离科学技术的科研开发与产业示范基地。
　　自HSCCC的基本设备问世至今的十多年间，在我国由张天佑创导和带领之下发展HSCCC与其应用技术研究的同时，HSCCC在不断向世界各地传播推广。目前，在美、英、法、德、瑞士、日、澳等数十个国家都已将此项新兴技术试用于生命科学、生物医药、农业、海洋生物、环保、新材料等广泛领域，尤其是在天然产物制备分离的应用领域，HSCCC的特点与功能得到了最明显的体现。瑞士洛桑大学药学院院长、国际著名植化学家Prof．K．Hostettmann 于1999年发表的再版专著"Preparative Chromatography Techniques-Application On Natural Products Separation(制备色谱技术--在天然产物分离中的应用)"，逆流色谱技术的篇幅逐版上升，已占有其中三分之一的内容，其中多处引用了我国张天佑的工作成果。
　　2000年9月，逆流色谱技术国际学术委员会决定在英国Brunel大学召开第一届国际逆流色谱技术学术会议CCC-2000。数十个国家和地区的专家学者首次会聚，交流总结了逆流色谱技术的原理、理论，设备研制、应用研究等方面的成果，它标志着此项新颖的分离技术进入了成熟和实用的历史阶段。张天佑教授作为该国际组织的主要成员，继此项技术的首创人Dr.Ito之后，主持了这一分离科学新颖分支的重要学术活动，并应邀在大会上作了题为"高速逆流色谱技术在分离天然产物活性成分方面的应用研究"的特邀报告。此项技术的国际学术委员会还决定，委托张天佑教授作为主席，主持筹备和召开第二届国际逆流色谱技术学术会议。这一学术盛会CCC-2002，将于2002年4月15日-20日在北京举行。CCC-2002将突出天然产物研究与开发的主题。这一国际学术活动在我国举行，必将促进该项技术在国际范围的研究发展与推广应用，必将进一步巩固和发展我国在此领域的领先优势和技术特色，必将有力地推动我国新颖分离技术同相关产业的结合。
四、我们的国际地位和技术优势
　　我们在HSCCC技术的研发方面，同首创国美国的NIH并驾齐驱。我们除了具有美国发明专利的知识产权之外，还在国内建立了分析型HSCCC、半制备型HSCCC、两维制备型HSCCC、pH区带精制型HSCCC、正交轴型HSCCC(用于大分子蛋白质分离)等一系列的专利技术和知识产权，是国际上此项技术装备开发最早、配备最齐、推广应用量最大的国家。在应用技术领域，我们在天然产物(包括中草药、农产品、生化制品等)成分分离纯化与制备方面，居国际领先的地位。张天佑教授除了在国内发表了多部专著之外，已在国际上合作发表了四部专著。例如，1996年在美国由John Wiley＆Sons公司出版的"High-Speed Countercurrent Chromatography(高速逆流色谱技术)"一书，张天佑教授应邀撰写了第8章HSCCC On Medicind Herbs(中草药应用)"。该书已被选编为著名的国际分析化学丛书的第132卷，在国际上广为发行。又如前面提到过的2000年在英国由Academic Press出版的"Encyclopedia Of Separation Science(分离科学百科全书)"，张天佑教授应邀撰写了HSCCC分离天然产物中生物碱、黄酮等类成分的章节。张天佑将于2002年在北京主持第二届国际逆流色谱技术学术会议，也体现了我国在此领域已具有创新和领先的工作成就。
　　我们在自主研发不同类型的HSCCC仪器设备的基础上，在自己的开放型的研究中心，大力开展了该技术在高纯度天然产物活性成分的分离制备方面的研究工作，我们已经从数十种常用中草药中分离纯化出高纯度的活性成分单体上百种。其中包括：银杏黄酮苷元异鼠李素和山柰酚、何首乌二苯乙烯苷、葛根素、紫杉醇及其多种类似物、三七苷和三七素、淫羊藿苷、白藜芦醇和白藜芦醇苷、丹参酮、苦参、生物碱、羌活醇、大黄蒽醌类衍生物、沙棘黄酮等等。我们还从农产品中分离纯化出一系列的单体化合物，其中包括高价值的强抗氧化物
番茄红素、茶叶中的单体儿茶素EGCG、ECG、GCG等。其中，异鼠李素和山柰酚已成为国家质量技术监督局审定批准的我国首例天然产物国家实物标准样品，其他单体的研制技术成果申报了一系列国家发明专利。
　　我们的工作，体现了HSCCC技术与多种先进的分离纯化技术相配合的综合技术优势，体现了在我国优势资源--天然产物资源、中医药和农产品开发利用资源的基础上建立的应用开发优势。

以下是HSCCC的原理(摘抄):
    2.1 高速逆流色谱仪原理及特点
    HSCCC利用了一种特殊的流体动力学(单向流体动力学平衡)现象。具体表现为一根100多米长的螺旋空管，注入互不相溶的两相溶剂中的一相作为固定相，然后作行星运动；同时不断注入另一相（流动相），由于行星运动产生的离心力场使得固定相保留在螺旋管内，流动相则不断穿透固定相；这样两相溶剂在螺旋管中实现高效的接触、混合、分配和传递。由于样品中各组分在两相中的分配比不同，因而能使样品中各组分得到分离。
  2.2 HSCCC的优点
    HSCCC主要具有以下几个方面的优点。
  2.2.1 应用范围广，适应性好。由于溶剂系统的组成与配比可以是无限多的，因而从理论上讲HSCCC适用于任何极性范围的样品的分离， 所以在分离天然化合物方面具有其独到之处。并因不需固体载体，而消除了气液色谱中由于使用载体而带来的吸附现象，特别适用于分离极性物质和其它具有生物活性的物质。
  2.2.2 操作简便，容易掌握。分离过程中对样品的前处理要求低，仅需一般的粗提物即可进行HSCCC的制备分离或分析。
  2.2.3 回收率高。由于没有固体载体，不存在吸附、降解和污染，理论上样品的回收率可达100％。在实验中只要调整好分离条件，一般都有很高的回收率。
  2.2.4 重现性好。如果样品不具有较强的表面活性作用，酸碱性也不强，那么多次进样，其分离过程稳定性都保持很好、峰的保留相对标准偏差也小于2%，重现性相当好。
  2.2.5 分离效率高，分离量较大。由于其与一般色谱的分离方式不同，能实现梯度操作和反相操作、亦能进行重复进样，使其特别适用于制备性分离，产品纯度高。研究结果表明:一台普通的高速逆流色谱仪一次进样可达几十毫升，一次可分离近10g的样品。因此，在80年代后期被广泛地应用于植物化学成分的分离制备研究。

好资料,今天才知道还有逆流色谱这种技术,以前没了解过,说不上什么.

为什么叫逆流色谱呢?没看出流向是怎么反过来的啊.

原文由 sunjing79 发表:
最近才知道高速逆流色谱这种技术,查了不少资料才知道我们国家在这项技术上还占据世界前沿.
从各种资料上都看到的是该技术的正面优点介绍,但作为一项并不算新的技术(我国1978年就有第一台逆流色谱仪器应用在中检所抗生素室,1988年就提出了HSCCC技术),多年来没有象HPLC那样普及,应该还是有些原因的.
请了解HSCCC技术的朋友们来讨论一下该技术的优势和劣势,以及应用范围究竟是哪些.

没听说过有这种色谱啊,什么时候的事,楼主有这方面的文章吗?

这个技术目前还不是很成熟哇  各种实验结果还是很不稳定的  有待进一步完善

这个技术用于中药成分的提取非常有用,用于日常检测还是太浪费时间了

对于日常检测为什么太费时间呢？
有这方面应用的文献吗？拿出来分享一下吧

原文由 xiaomity 发表:
这个技术用于中药成分的提取非常有用,用于日常检测还是太浪费时间了

我这里倒是有些关于高速逆流色谱的文献，近年来国内很多研究人员开始热衷于使用HSCCC。当然在分析方面的确不如HPLC，不过在一些样品的粗分离甚至精制上可以媲美制备型HPLC，但是HSCCC分离条件的摸索是个难题。

HSCCC在中草药分离上占有很大的优势，在制备量和成本上优于制备HPLC，但要熟悉溶剂的选择。