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主题：【求助】Hitachi F4500 3D扫描

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cnzxchen

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发表于：2007/12/18 10:57:11 楼主管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

请问各位大哥大姐，我的机器是日立F4500，如果不知道样品的激发和发射波长情况下，扫样品的3D能不能找到样品的激发和发射波长？应该怎么去找？不胜感激。any words from you will be greatly appreciated. thank you

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2007/12/18 14:10:57 沙发管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

还有个问题，我看师兄师姐们扫描发射光谱时，设置的发射波长范围下限为：激发波长+30，上限为：激发波长*2-20。问他们为什么，只说为了避免倍频峰影响，我认为这样就人为的把可能出在2倍激发波长外的发射峰排除了，难道样品的发射峰不会出现在2倍和3倍倍频峰之间某个位置吗？请高手不吝赐教

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夕阳

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2007/12/22 12:46:32 板凳管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 cnzxchen 发表:
请问各位大哥大姐，我的机器是日立F4500，如果不知道样品的激发和发射波长情况下，扫样品的3D能不能找到样品的激发和发射波长？应该怎么去找？不胜感激。any words from you will be greatly appreciated. thank you

关于荧光三维扫描方式的用法，说明书中有详细的介绍，请参阅。

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夕阳

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2007/12/22 14:00:44 马扎管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 cnzxchen 发表:
还有个问题，我看师兄师姐们扫描发射光谱时，设置的发射波长范围下限为：激发波长+30，上限为：激发波长*2-20。问他们为什么，只说为了避免倍频峰影响，我认为这样就人为的把可能出在2倍激发波长外的发射峰排除了，难道样品的发射峰不会出现在2倍和3倍倍频峰之间某个位置吗？请高手不吝赐教

按照说明书的要求，发射波长下限只要大于激发波长10nm即可。
楼主在这里将倍频和二级散射光的概念弄混了。
我们一般在发射光谱上看到的除了荧光峰外，还有散射光谱和拉曼光谱。
散射光谱还分为一级散射和二级散射，它是由激发光谱引起的；一级散射也称之为瑞利散射，他的波长与激发波长一致，为了克服瑞利光谱的干扰，所以发射波长的设置下限要大于激发波长，这就是楼主所说的“＋30nm”的出处所在。另一种散射光谱称为：【二级散射光谱】也就是楼主所说的“倍频峰”；二级散射光谱的波长是激发波长的两倍，它是因激发单元的光栅等光学器件的谐波造成的，是一种客观的物理现象，一般它不会影响荧光的结果，如果它的波长接近了荧光波长就要考虑使用滤光片了。至于更高级的散射光谱的波长更长了，有的甚至超出了仪器的测量范围，我们观察不到了，因此人们往往就不加于考虑了。对于二级散射光谱，有些学者倒是称之为“鬼峰”而不是“倍频峰”。
所谓的倍频实际波长要小于激发波长，由于我们平时采用的是“正常斯托克斯”方式测量，也就是发射光谱的波长大于激发波长，因此使用者是观察不到的。如果采取“反斯托克斯”方式测量，即发射波长小于激发波长，则就要考虑倍频峰的影响了。
区别二级散射光谱和荧光光谱的方法是：改变激发光谱的波长后，荧光峰的位置不变，仅是强度改变了；而二级散射光谱或拉曼光谱的峰位置随之改变。
对于倍频和二级散射光谱的概念许多使用者往往是混淆了。

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