主题:【资料】移液器的正确操作和注意事项简介

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两分钟检查法:
这是可以对手中移液器进行快速检查的一种简单方法,通过检查,来判断我们手中的移液器是否处于一种正常的工作状态。

1、测漏:我们手中的移液器叫空气排代式移液器,如果出现漏气的情况,那我们的取样结果就肯定不会准确,这将直接影响到我们实验的最终结果,后果是比较比较严重的。那么,如何判断移液器是否漏气呢?这就需要我们对它做一个简单的测试,首先,取一个透明的容器,装上水,将需要测试的移液器装上吸头,吸上水,如果是P2、P10、P20、P100、P200的移液器,请将吸头浸入液面1——2毫米,静待20秒,观察吸头内部液面是否下降,如果下降了,就说明您手中的移液器出现了漏气的情况;如果是P1000、P5000、P10ML的移液器,请将吸头朝下悬垂20秒,观察是否有液体下滴,如果有,说明您手中的移液器也出现了漏气的情况。出现了漏气的情况怎么办呢?

2、查找故障原因:首先,检查吸头安装是否到位,换掉吸头再次测试,以排除因吸头的关系产生的漏气情况;接着,检查白套筒的端口部份(即白套筒与吸头接触的部份)是否有刮痕;然后,再检查白套筒与手柄之间的连接螺帽是否松动。如果这些情况都没有,就说明密封圈或活塞组件有损坏,请您跟我们取得联系,我们会上门为您解决。

3、检查外观:按动排放按钮,感觉是否顺畅,听是否有噪音,观察排放杆是否有弯曲;旋转调节按钮,观察计数器的读数是否有偏差。

一、移液器的拆卸安装步骤:

1、拨掉吸头弹射器放入盛放盘内;

2、将容量值调至最大,拧开白套筒与手柄之间的连接螺帽;

3、白套筒端口向下,轻轻提起手柄放入盛放盘内,按住活塞尾部,将白套筒端口向上,置于盛放盘上部,小心取出活塞组件,以免弄掉零件;

4、从活塞杆上或白套筒内取出密封圈,放入盛放盘内。

5、安装,其步骤与拆卸正好相反。需要注意的是,密封圈的黑色部份朝向白套筒,白色部份朝向手柄。

二、维护保养:

1、定期清洁我们手中的移液器,用酒精棉即可,主要擦拭手柄、弹射器及白套筒外部,既可以保持美观,又降低了对样品产生污染的可能性。

2、在吸取过高挥发、高腐蚀液体后,应将整支移液器拆开,用蒸馏水冲洗活塞杆及白套筒内壁,并在晾干后安装使用。以免挥发性气体长时间吸附于活塞杆表面,对活塞杆产生腐蚀,损坏您的移液器。
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一个完整的移液循环,包括吸头安装——容量设定——预洗吸头——吸液——放液——卸去吸头等六个步骤。每一个步骤都有需要遵循的操作规范。
1.吸头安装:
正确的安装方法叫旋转安装法,具体的做法是,把白套筒顶端插入吸头(无论是散装吸头还是盒装吸头都一样),在轻轻用力下压的同时,把手中的移液器按逆时针方向旋转180度。切记用力不能过猛,更不能采取剁吸头的方法来进行安装,因为那样做会对您手中的移液器造成不必要的损伤。
2.容量设定:
正确的容量设定分为两个步骤,一是粗调,即通过排放按钮将容量值迅速调整至接近自己的预想值;二是细调,当容量值接近自己的预想值以后,应将移液器横置,水平放至自己的眼前,通过调节轮慢慢地将容量值调至预想值,从而避免视觉误差所造成的影响。
在容量设定时,还有一个需要特别注意的地方。当我们从大值调整到小值时,刚好就行;但从小值调整到大值时,就需要调超三分之一圈后再返回,这是因为计数器里面有一定的空隙,需要弥补。
3.预洗吸头:
在我们安装了新的吸头或增大了容量值以后,应该把需要转移的液体吸取、排放两到三次,这样做是为了让吸头内壁形成一道同质液膜,确保移液工作的精度和准度,使整个移液过程具有极高的重现性。其次,在吸取有机溶剂或高挥发液体时,挥发性气体会在白套筒室内形成负压,从而产生漏液的情况,这时就需要我们预洗四到六次,让白套筒室内的气体达到饱和,负压就会自动消失。
4.吸液:
先将移液器排放按钮按至第一停点,再将吸头垂直浸入液面,浸入的深度为:P2、P10小于或等于1毫米,P20、P100、P200小于或等于2毫米,P1000小于或等于3毫米,P5ML、P10ML小于或等于4毫米(浸入过深的话,液压会对吸液的精确度产生一定的影响,当然,具体的浸入深度还应根据盛放液体的容器大小灵活掌握),平稳松开按钮,切记不能过快。
5. 放液:
放液时,吸头紧贴容器壁,先将排放按钮按至第一停点,略作停顿以后,再按至第二停点,这样做可以确保吸头内无残留液体。如果这样操作还有残留液体存在的话,您就应该考虑更换吸头了。
6. 卸掉吸头:
卸掉的吸头一定不能和新吸头混放,以免产生交叉污染。

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移液器的种类和使用


准确的分析方法对于生物化学实验是极为重要的,在各种生物化学分析技术中,首先要熟练掌握的就是准确的移液技术。为此要用到各种形式的移液管,其中有一些是学生们在化学实验中未用过而在生化实验中是常用的。
1 滴管
使用方便,可用于半定量移液,其移液量为1mL~5mL,常用2mL,可换不同大小的滴头。滴管有长、短两种,新出的一种带刻度和缓冲泡的滴管,可以比普通滴管更准确地移液,并防止液体吸入滴头。
2 移液管(吸管)
吸管使用前应洗至内壁不挂水珠,1mL 以上的吸管用吸管专用刷刷洗,0.1mL、0.2mL 和0.5mL的吸管可用洗涤剂浸泡,必要时可以用超声清洗器清洗。由于铬酸洗液致癌,应尽量避免使用。若有大量成批的吸管洗后冲洗,可使用冲洗桶,将吸管尖端向上置于桶内,用自来水多次冲洗后再用蒸馏水或无离子水冲洗。
吸管分为两种,一种是无分度的,称为大肚吸管,精确度较高,其相对误差A 级为0.7%~0.8%,B 级为1.5%~0.16%,液体自标线流至口端(留有残液),A 级等待15s,B 级等待3s。另一种吸管为分度吸管,管身为一粗细均匀的玻璃管,上面均匀刻有表示容积的分度线,其准确度低于胖肚吸管,相对误差A 级为0.8%~0.2%,B 级为1.6%~0.4%,A 级、B 级在吸管身上有A、B 字样,有”快”字则为快流式,有”吹”字则为吹出式,无”吹”字的吸管不可将管尖的残留液吹出。吸、放溶液前要用吸水纸擦拭管尖。
3 微量进样器
微量进样器常用作气相液相色谱仪的进样器,在生化实验中主要是用作电泳实验的加样器,通
常可分为无存液和有存液两种。
(1)10μL 以下的极微量液体进样。
无存液微量进样器:进样器的不锈钢芯子直接通到针尖端处,不会出现存液。
(2)10μL~100μL 有存液微量进样器:不锈钢的针尖管部分是空管,进样器的柱塞不能到达,因而管内会存有空气或液体,其使用注意事项是:①不可吸取浓碱溶液,以免腐蚀玻璃和不锈钢零件;②因为有存液,所以吸液时要来回多拉几次,将针尖管内的气泡全部排尽;③针尖管内孔极小,使用后尤其是吸取过蛋白质溶液后,必须立即清洗针尖管,防止堵塞。若遇针尖管堵塞,不可用火烧,只能用φ0.1mm 的不锈钢丝耐心串通;④进样器未润湿时不可来回干拉芯子,以免磨损而漏气;⑤若进样器内发黑,有不锈钢氧化物,可用芯子蘸少量肥皂水,来回拉几次即可除之。
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4 自动取液器
这种取液器在生化实验中大量地使用,它们主要用于多次重复的快速定量移液,可以只用一只手操作,十分方便。移液的准确度(即容量误差)为±(0.5%~1.5%),移液的精密度(即重复性误差)更小些,为≤0.5%。
取液器可分为二种:一种是固定容量的,常用的有100μ L 等多种规格。每种取液器都有其专用的聚丙烯塑料吸头,吸头通常是一次性使用,当然也可以超声清洗后重复使用,而且此种吸头还可以进行120℃高压灭菌;另一种是可调容量的取液器,常用的有200μL、 500μL 和1000μL 等几种。
可调式自动取液器的操作方法是用拇指和食指旋转取液器上部的旋钮,使数字窗口出现所需容量体积的数字,在取液器下端插上一个塑料吸头,并旋紧以保证气密,然后四指并拢握住取液器上部,用拇指按住柱塞杆顶端的按钮,向下按到第一停点,将取液器的吸头插入待取的溶液中,缓慢松开按钮,吸上液体,并停留1~2秒钟(粘性大的溶液可加长停留时间),将吸头沿器壁滑出容器,用吸水纸擦去吸头表面可能附着的液体,排液时吸头接触倾斜的器壁,先将按钮按到第一停点,停留一秒钟(粘性大的液体要加长停留时间),再按压到第二停点,吹出吸头尖部的剩余溶液,如果不便于用手取下吸头,可按下除吸头推杆,将吸头推入废物缸,如图1—1、1—2、1—3和图1—4。


图1-1 自动取液器的构造         


  图1-2 自动取液器的使用




自动取液器的使用注意事项是:
①吸取液体时一定要缓慢平稳地松开拇指,绝不允许突然松开,以防将溶液吸入过快而冲入取液器内腐蚀柱塞而造成漏气。
②为获得较高的精度,吸头需预先吸取一次样品溶液,然后再正式移液,因为吸取血清蛋白质溶液或有机溶剂时,吸头内壁会残留一层”液膜”,造成排液量偏小而产生误差。
③浓度和粘度大的液体,会产生误差,为消除其误差的补偿量,可由试验确定,补偿量可用调节旋钮改变读数窗的读数来进行设定。
④可用分析天平称量所取纯水的重量并进行计算的方法,来校正取液器,1mL 蒸馏水20℃时重
0.9982g。
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多谢分享,老大。第一次来到这个板块,发现还有人在这儿请教万通ph电极如何校正的问题,其实应该发在电化学综合论坛,还有实验室其他设备论坛的存在,里面有请教天平的问题的,这就说明了板块太多的弊端,乱成一锅粥了。
xiaoxueer
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没想到用移液器还有这么多的学问,以前用的时候移二氯甲烷的时候经常遇到液滴自动滴的情形都不知道怎么处理,只有动作快点,今日一见才知是没有预洗的缘故。还有放置吸头的时候感觉松紧不一样的时候移的量也不一样。今天终于学到了正确的做法,非常感谢!
麦 兜
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