我用PSS 作标样,分子量分别为1100,3100,6500,14500,31000。目标样品分子量在4000-6000。因为是多聚糖,我先用紫外检测器作,结果我用Agilent1100 作到4200,与其它两个实验室凝胶色谱仪RI做到的5800有很大出入,十分疑惑,柱子是他Tosoh 的SWXL2000,Buffer:10% ACN+0.2M PBS,另我用的是Agilent的GPC软件,而工程师说只能宽标作,先到外面用其它方法测一个分子量的值再作为宽标再作,而Pss 和我的样品因为不是一个种类所以不能直接作窄标(普适因为没有A值K值没法做)。而研究所一位朋友则认为如果排除疏水键的作用,可以直接用PSS 作为标准作一曲线,再运行样品计算结果。当然最好用葡聚糖作标准,但没有那么小分子量。
小弟刚开始做凝胶色谱,向各位凝胶高手求助!本贴对有重大帮助的友人另送分20,没有限制。