主题：【华山论剑第十四集】基质效应专题

活到九十 学到一百回复于2008/04/17

基质指的是样品中被分析物以外的组分。基质常常对分析物的分析过程有显著的干扰，并影响分析结果的准确性。例如，溶液的离子强度会对分析物活度系数有影响，这些影响和干扰被称为基质效应（matrix effect）。
　　目前最常用的去除基质效应的方法是，通过已知分析物浓度的标准样品，同时尽可能保持样品中基质不变，建立一个校正曲线（calibration curve）。固体样品同样有很强的基质效应，对其校正也尤为重要。
　　对于复杂的或者未知组分基质的影响，可以采用标准添加法（standard addition method）。在这一方法中，需要测量和记录样品的响应值。进一步加入少量的标准溶液，再次记录样品的响应值。理想地说来，标准添加应该增加分析物的浓度1.5到3倍，同时几次添加的溶液也应该保持一致。使用的标准样品的体积应该尽可能小，尽量降低过程中对基质的影响。

sgwu回复于2008/04/19

基质效应也称基体效应，是指样品中共存物质对测量结果的影响。目前使用的各种样品的前处理方法就是为了消除基体效应。具体地说，基体效应包括干扰组分的影响和背景值的影响。干扰组分是必须要分离出去的，而背景值的消除一般是采用标准加入法或基线扣除法。

44sbb回复于2008/04/19

基质效应 
  1基质（matrix） 尚无统一的解释，曾称为“一种分析物（analyte）的环境（milieu）”，即指标本中除分析物以外的一切组成。以血清胆固醇（Chol）测定而言，就是指Chol以外血清中的一切成分及其物理、化学性质。

2.基质效应（matrix effect） 按NCCLS文件的定义，指

（1）标本中除分析物以外的其他成分对分析物测定值的影响。

（2）基质对分析方法准确测定分析物的能力的干扰。广义说来，基质效应也应包括已知的干扰物（如Chol测定中胆红素、血红蛋白、抗坏血酸等都是干扰物），但目前只将基质效应限于生物材料中未知或未定性的物质或因素（如粘度、pH等）的影响。

3.基质偏差（matrix bias） 基质效应所致分析结果的偏差称为基质偏差。 用作校准物质或质控物的经过处理的混合血清，由于血清基质的理化性质在处理过程中的改变，在常规测定上往往出现基质偏差。 基质偏差的出现也与分析系统（包括方法、试剂及所用仪器设备）有关，所以有人将基质效应定性为方法、材料与基质的特异性反应。

4.制备物（processed material） 用于血脂常规测定的校准液（calibrator）及用于技能对比试验（proficiency test，PT）或室间质量评价（EQA）的样品（如质控血清）。 以Chol测定为例，全酶法测Chol始于1974年，在此以前用化学反应测Chol时，除了一些已知的干扰因素外尚未提及基质效应问题。1979年才由Cooper指出Chol酶法中校准液与病人血清的反应性不同，可使Chol测定值偏低5%～7%。 1994年CAP调查570实验室时用了参考方法定值的新鲜冰冻血清为调查材料，15个同方法测定chol组中仍有11个组出现基质偏差，同时用制备物的4个组中，3个有基质偏差。 有的报告指出TG、HDL-C常规方法与CDC的参考方法比较，有明显偏差，甚至>10%。 McNamura等发现血清冰冻可在免疫法（用apoAI与E抗体分离LDL）直接测定LDL-C时出现明显基质效应，血清冰冻保存2～26周后，LDL-C测定值平均偏低10%左右。 由于新鲜血清与冻干血清的apoAI测定值一致，显示冻干对apoAI测定不产生基质效应，故apoAI参考血清以冻干形式提供。但冻干对apoB有极明显的影响，在不同原理的免疫法中，基质偏差高达-26%～+4%，但这种变化也包括apoB分子本身的结构变化在内。所以apoB参考血清是液态冰冻保存的。

5.减少基质效应的方法 Naito等（1993年）提出过减少基质效应的研究方向，至今仍有参考价值：改进室间质评样品，使其作用更像新鲜人血清。 改进仪器设计及试剂组成。 选择方法及方法学参数，使其适应性更强，且容易掌握，对制备物（校准物、室间质评样品与质控物）基质的确切性质不敏感。
 
   
   
   

badbed回复于2008/05/04

AC上有一篇关于Matrix effext介绍得很详细的文献，作者B. K. Matuszewski等，2003，75，3019-3030

，感兴趣的可以下来学习学习。下面谈谈我的理解。

随着质谱的普及，生物样品的定量工作开始普遍使用LC/MS/MS进行。质谱的高选择性决定了其作为检测器与紫外的不同——非待测物可以不被检测，这就使得高通量成为现实。然而，生物样品中的共流出物并非不存在，它对待测物的离子化的影响仍然存在。简单的说，基质效应就是样品中的共流出物对待测物离子化过程的影响，其原理至今未有定论，目前普遍认为是共流出物与待测物在离子化时存在竞争关系导致引起的。分为离子抑制和离子增强两种。顾名思义，就是会对待测物的离子化有增强和抑制的作用，这肯定会影响待测物的准确定量。

评价方法很简单，就是在做method validation时，分别制备回收率样品和基质效应样品，然后比较二者的峰面积，待测物与内标的分别计算。
ME％=回收率样品峰面积/基质效应样品峰面积*100%
85%-115%之间认为不存在基质效应。
其中低、中、高浓度各6份，回收率样品就按照正常方法制备，基质效应样品就是把待测物和内标以流动相稀释到对应浓度即可。（回收率样品说起来也能说很多，此处不谈）

了解了原理自然就有办法避免基质效应，一句话说来就是调整色谱保留时间。通常来说死时间的基质效应最严重且多为离子抑制，要尽量避免死时间出峰。当然，也不能说避开了死时间就万事大吉。在方法开发阶段，可以做一对回收率样品和基质效应样品在不同色谱条件下考察基质效应。尽量缩短保留时间提高通量，同时避免基质效应。

也看文献说ESI源容易产生基质效应而APCI源较好，这个不太好说，我也用APCI做过基质效应较高的化合物。换源的时间还不如拿来优化色谱条件（个人看法）。

另外，优化样品预处理方法也可以在一定程度上避免离子抑制，当然也不绝对，色谱条件选好了沉淀蛋白也能做一个好方法。

一家之见，欢迎讨论。