色谱峰拖尾的原因有很多,例如:
1.色谱柱本身填装问题,筛板堵塞或填料塌陷;柱坏;
2.柱头有污染;
3.样品超载;
4.样品溶剂不合适;
5.柱外效应;
6.化学或二次保留(硅羟基)效应;
7. 缓冲容量不足或不合适;
8. 重金属污染。
解决方法如下:
一、 与色谱柱有关的拖尾问题
1.如柱头处有强保留的样品组分积聚,反相柱可用20倍柱体积的96%的二氯甲烷与4%甲醇,加1%氢氧化铵混合液冲洗;正相柱可用甲醇冲洗;
2.使用保护柱。
二、 与HPLC系统有关的峰拖尾和峰加宽 1.进样体积过大,(通常≤25μL);
2.进样阀与色谱柱及检测器之间的管路体积过大(最佳连接管应<20cm,内径为0.007");
3.检测器流通池的体积过大。